Creatie van Muizen Experimentele abdominale aorta-aneurysma met Elastase
Summary
Deze video laat zien hoe u abdominale aorta-aneurysma (AAA) te induceren in muizen via voorbijgaande intraluminale infusie van varkens pancreas elastase in de infrarenale segment van de abdominale aorta. Het model heeft de mogelijkheid om breed inzicht toe te voegen in de pathobiologie van AAA te wijten aan de opkomst van tal van transgene en knockout muizen.
Abstract
Voorbijgaande intraluminale infusie van varkens pancreas elastase in de infrarenale segment van de abdominale aorta is de meest gebruikte diermodel van de abdominale aorta aneurysma (AAA) sinds het voor het eerst werd beschreven in ratten door Anidjar en collega's. 1 De reden voor de ontwikkeling is gebaseerd op de verstoorde aard van de elastine waargenomen in AAA. Deze rat model is aangepast aan AAA produceren in de infrarenale aorta gebied van muizen. 2 Het model heeft de mogelijkheid om breed inzicht toe te voegen in de pathobiologie van AAA te wijten aan de opkomst van tal van transgene en knockout muizen. Bovendien is het een levensvatbaar platform om potentiële therapeutische middelen test voor AAA. In deze video, tonen we de elastase infuus AAA procedure die wordt gebruikt in ons laboratorium.
Muizen zijn verdoofd met behulp van 2,5% isofluraan, en een laparotomie wordt uitgevoerd onder steriele omstandigheden. De abdominale aortais geïsoleerd met behulp van een werkend stereomicroscoop (Leica). Na het plaatsen van een tijdelijke ligaturen rond de proximale en distale aorta, is een aortotomy gemaakt op de splitsing met de punt van een 30-gauge naald. Een warmte-taps segment van de PE-10 polyethyleen buis is ingevoerd door de aortotomy en beveiligd. De aorta-lumen wordt vervolgens doorbloed voor 5-15 minuten op 100 mm Hg met een zoutoplossing die type I varkens pancreas elastase (4,5 U / ml; Sigma Chemical Co.) Na het verwijderen van de perfusie katheter, is de aortotomy gerepareerd zonder vernauwing van het lumen.
Protocol
Discussion
Eerdere studies hebben opgemerkt significante lot-tot-lot variatie in AAA ontwikkeling van verschillende commerciële elastase voorbereidingen 3. Zo is het essentieel om de productie te veel controleren, alsook de nodige controle groepen hebben om het vermogen van de voorbereiding op AAA veroorzaken document.
Interessant is dat gevoeligheid voor AAA ontwikkeling in dit model is afhankelijk van de muizenstam gebruikt 3. De muis gebruikt in de huidige video is van de C57B…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Dit werk werd ondersteund de SCCOR subsidie "AAA Disease: Mechanismen, gelaagdheid, en behandeling" (P50 HL083800-03) van de National Institutes of Health
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Type I porcine pancreatic elastase | Reagent | Sigma | E1250 | |
| polyethylene tubing (PE-10) | CLAY ADAMS | 427400 | ||
| CHANGE-A-TIP | Bovie | 18010-00 (FST) | cautery knife | |
| LEICA MZ6 | Leica | stereomicroscope | ||
| LEICA DFC290HD | Leica | USB camera | ||
| Image Pro Express ver. 6.0 | Media Cybernetics | software |
References
- Anidjar, S., Salzmann, J. L., Gentric, D. Elastase-induced experimental aneurysms in rats. Circulation. 82 (3), 973-973 (1990).
- Pyo, R., Lee, J. K., Shipley, J. M. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase B) suppresses development of experimental abdominal aortic aneurysms. J Clin Invest. 105 (11), 1641-1641 (2000).
- Carsten, C. G., Calton, W. C., Johanning, J. M. Elastase is not sufficient to induce experimental abdominal aortic aneurysms. J Vasc Surg. 33 (6), 1255-1255 (2001).
