خلق الفئران التجريبية تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني مع إيلاستاز
Summary
هذا الفيديو يبين كيف للحث على تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني (AAA) في الفئران عن طريق التسريب داخل اللمعة عابر إيلاستاز البنكرياس الخنازير في الجزء infrarenal من الشريان الأورطي البطني. نموذج لديه القدرة على رؤية واسعة إضافة إلى البيولوجيا المرضية من AAA نظرا لظهور العديد من الفئران المعدلة وراثيا خروج المغلوب الجينات.
Abstract
التسريب داخل اللمعة عابر إيلاستاز البنكرياس الخنازير في الجزء infrarenal من الشريان الأورطي البطني هو النموذج الحيواني الأكثر استخداما على نطاق واسع من الأبهر البطني (AAA) منذ ذلك الحين وصفت لأول مرة في الفئران عن طريق Anidjar والزملاء ، واستند (1) الأساس المنطقي لتنميتها على طبيعة متقطعة من الإيلاستين التي لوحظت في AAAS. وقد تم تعديل هذا النموذج الفئران لانتاج AAAS في المنطقة الأبهر infrarenal من الفئران. (2) نموذج لديه القدرة على رؤية واسعة إضافة إلى البيولوجيا المرضية من AAA نظرا لظهور العديد من الفئران المعدلة وراثيا خروج المغلوب الجينات. وعلاوة على ذلك ، بل هو منصة قابلة للاختبار وكلاء العلاجية المحتملة لAAA. في هذا الفيديو ، ونحن لشرح إجراءات ضخ إيلاستاز AAA المستخدمة في المختبر لدينا.
يتم تخدير الفئران باستخدام 2.5 ٪ isoflurane ، ويتم تنفيذ عملية فتح البطن تحت ظروف معقمة. وaortais البطن المعزولة بمساعدة من stereomicroscope التشغيل (لايكا). بعد وضع الحروف المركبة مؤقتة حول الشريان الأورطي القريبة والبعيدة ، يتم إنشاء بضع الأبهر في التشعب مع غيض من إبرة عيار 30. وقدم قطعة للحرارة مدبب من أنابيب البولي اثيلين PE – 10 خلال بضع الأبهر والمضمون. هو perfused لاحقا لمعة الأبهر 5-15 دقائق في 100 ملم زئبق مع المياه المالحة التي تحتوي على نوع الأول الخنزيري إيلاستاز البنكرياس (4.5 U / مل ؛ سيغما كيميكال). بعد إزالة القسطرة التروية ، يتم إصلاح بضع الأبهر دون انقباض في التجويف.
Protocol
Discussion
وقد لاحظت دراسات سابقة هامة الكثير الكثير إلى التباين في التنمية من مختلف التحضيرات AAA إيلاستاز التجاري 3. وبالتالي ، فمن الأهمية بمكان رصد الكثير الإنتاج ، فضلا عن أن جماعات المراقبة المناسبة بغية توثيق القدرة على إعداد للحث على AAAS.
<p class="jove_content" style=";text-align:righ…Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وأيد هذا العمل منحة SCCOR "مرض AAA : آليات ، الطبقات ، والمعالجة" (P50 HL083800 – 03) من المعاهد الوطنية للصحة
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Type I porcine pancreatic elastase | Reagent | Sigma | E1250 | |
| polyethylene tubing (PE-10) | CLAY ADAMS | 427400 | ||
| CHANGE-A-TIP | Bovie | 18010-00 (FST) | cautery knife | |
| LEICA MZ6 | Leica | stereomicroscope | ||
| LEICA DFC290HD | Leica | USB camera | ||
| Image Pro Express ver. 6.0 | Media Cybernetics | software |
References
- Anidjar, S., Salzmann, J. L., Gentric, D. Elastase-induced experimental aneurysms in rats. Circulation. 82 (3), 973-973 (1990).
- Pyo, R., Lee, J. K., Shipley, J. M. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase B) suppresses development of experimental abdominal aortic aneurysms. J Clin Invest. 105 (11), 1641-1641 (2000).
- Carsten, C. G., Calton, W. C., Johanning, J. M. Elastase is not sufficient to induce experimental abdominal aortic aneurysms. J Vasc Surg. 33 (6), 1255-1255 (2001).
