Erstellung von Murine Experimental Bauchaortenaneurysmen mit Elastase
Summary
Dieses Video zeigt, wie man abdominalen Aortenaneurysmen (AAA) in Mäusen über vorübergehende intraluminale Infusion von Schweine-Pankreas-Elastase in der infrarenalen Segment der abdominalen Aorta induzieren. Das Modell verfügt über die Fähigkeit zur umfassenden Einblick in die Pathobiologie von AAA durch die Entstehung zahlreicher transgenen und Knockout-Mäuse hinzu.
Abstract
Transient intraluminale Infusion von Schweine-Pankreas-Elastase in der infrarenalen Segment der abdominalen Aorta ist die am weitesten verbreitete Tiermodell von Aortenaneurysmen (AAA), seit es zum ersten Mal in Ratten durch Anidjar und Kollegen beschrieben. 1 Die Begründung für seine Entwicklung beruhte auf die gestörte Natur von Elastin beobachtet in AAAS. Dieses Rattenmodell wurde geändert, um AAA in der infrarenalen Aorten-Region von Mäusen zu produzieren. 2 Das Modell verfügt über die Fähigkeit zur umfassenden Einblick in die Pathobiologie von AAA durch die Entstehung zahlreicher transgenen und Knockout-Mäuse hinzu. Darüber hinaus ist es eine tragfähige Plattform für potenzielle Therapeutika für AAA-Test. In diesem Video zeigen wir die Elastase Infusion AAA Verfahren in unserem Labor eingesetzt.
Mäuse sind narkotisiert mit 2,5% Isofluran und einer Laparotomie wird unter sterilen Bedingungen durchgeführt. Die abdominale aortais mit Hilfe eines Betriebssystems Stereomikroskop (Leica) isoliert. Nach der Platzierung temporäre Ligaturen um den proximalen und distalen Aorta, ist ein Aortotomie an der Bifurkation mit der Spitze einer 30-Gauge-Nadel erzeugt. Ein Wärme-konische Segment der PE-10 Polyethylen-Rohr wird durch die Aortotomie eingeführt und gesichert. Die Aorta wird anschließend für 5-15 Minuten bei 100 mm Hg mit Kochsalzlösung mit Typ-I-Schweine-Pankreas-Elastase (; Sigma Chemical Co. 4,5 U / ml) perfundiert. Nach dem Entfernen der Perfusionskatheter ist die Aortotomie ohne Einengung des Lumens repariert.
Protocol
Discussion
Frühere Studien haben signifikante viel zu viel Variation in AAA Entwicklung von verschiedenen kommerziellen Elastase Vorbereitungen 3 notiert haben. Daher ist es wichtig, die Produktion viel zu überwachen sowie die entsprechenden Kontrollgruppen haben, um die Fähigkeit der Vorbereitung auf die AAA induzieren Dokument.
Interessant ist, dass die Anfälligkeit für AAA Entwicklung in diesem Modell hängt von der Maus-Stamm gebraucht 3. Die Maus in das aktuelle Video ve…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
(P50 HL083800-03) von der National Institutes of Health: Diese Arbeit wurde der SCCOR gewähren "Mechanismen, Schichtung und Behandlung AAA-Krankheit" unterstützt
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Type I porcine pancreatic elastase | Reagent | Sigma | E1250 | |
| polyethylene tubing (PE-10) | CLAY ADAMS | 427400 | ||
| CHANGE-A-TIP | Bovie | 18010-00 (FST) | cautery knife | |
| LEICA MZ6 | Leica | stereomicroscope | ||
| LEICA DFC290HD | Leica | USB camera | ||
| Image Pro Express ver. 6.0 | Media Cybernetics | software |
References
- Anidjar, S., Salzmann, J. L., Gentric, D. Elastase-induced experimental aneurysms in rats. Circulation. 82 (3), 973-973 (1990).
- Pyo, R., Lee, J. K., Shipley, J. M. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase B) suppresses development of experimental abdominal aortic aneurysms. J Clin Invest. 105 (11), 1641-1641 (2000).
- Carsten, C. G., Calton, W. C., Johanning, J. M. Elastase is not sufficient to induce experimental abdominal aortic aneurysms. J Vasc Surg. 33 (6), 1255-1255 (2001).
