Criação de Murina Experimental aneurismas de aorta abdominal com Elastase
Summary
Este vídeo mostra como induzir aneurismas da aorta abdominal (AAA) em camundongos através de infusão intraluminal transitória da elastase pancreática suína no segmento de infra-renal da aorta abdominal. O modelo tem a capacidade de adicionar uma visão ampla para o pathobiology da AAA, devido ao surgimento de inúmeros transgênicos e camundongos knockout do gene.
Abstract
Infusão intraluminal transitória da elastase pancreática suína no segmento de infra-renal da aorta abdominal é o modelo animal mais usado do aneurisma de aorta abdominal (AAA) desde que foi descrita pela primeira vez em ratos por Anidjar e colegas. Lógica 1 A para o seu desenvolvimento foi baseado sobre a natureza perturbada de elastina observado em AAA. Este modelo de rato tenha sido modificado para produzir AAA na região da aorta infra-renal de ratos. 2 O modelo tem a capacidade de adicionar uma visão ampla para o pathobiology da AAA, devido ao surgimento de inúmeros transgênicos e camundongos knockout do gene. Além disso, é uma plataforma viável para testar potenciais agentes terapêuticos para AAA. Neste vídeo, demonstramos o processo de infusão elastase AAA utilizado em nosso laboratório.
Os ratos são anestesiados com isoflurano 2,5%, e uma laparotomia é realizada sob condições estéreis. O aortais abdominal isolada com o auxílio de um estereomicroscópio operacional (Leica). Depois de colocar ligaduras temporário em torno da aorta proximal e distal, um aortotomia é criado na bifurcação com a ponta de uma agulha de calibre 30. Um segmento de calor cônico da PE-10 tubos de polietileno é introduzido através da aortotomia e seguro. A luz aórtica é posteriormente perfundidos por 5-15 minutos a 100 mm Hg com o tipo contendo salina eu suína elastase pancreática (4,5 U / mL; Sigma Chemical Co.). Após a remoção do cateter de perfusão, o aortotomia é reparado sem constrição da luz.
Protocol
Discussion
Estudos anteriores observaram variação de lote para lote significativo no desenvolvimento de diferentes preparações AAA elastase comercial 3. Assim, é fundamental para monitorar lotes de produção, bem como ter grupos de controle apropriados a fim de documentar a capacidade da preparação para induzir AAA.
Curiosamente, a susceptibilidade para o desenvolvimento deste modelo AAA é dependente da cepa do mouse usado 3. O rato usado no vídeo atual é da cepa C57BL …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho foi apoiado a concessão SCCOR "Doença AAA: Mecanismos, estratificação e tratamento" (P50 HL083800-03) do National Institutes of Health
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Type I porcine pancreatic elastase | Reagent | Sigma | E1250 | |
| polyethylene tubing (PE-10) | CLAY ADAMS | 427400 | ||
| CHANGE-A-TIP | Bovie | 18010-00 (FST) | cautery knife | |
| LEICA MZ6 | Leica | stereomicroscope | ||
| LEICA DFC290HD | Leica | USB camera | ||
| Image Pro Express ver. 6.0 | Media Cybernetics | software |
References
- Anidjar, S., Salzmann, J. L., Gentric, D. Elastase-induced experimental aneurysms in rats. Circulation. 82 (3), 973-973 (1990).
- Pyo, R., Lee, J. K., Shipley, J. M. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase B) suppresses development of experimental abdominal aortic aneurysms. J Clin Invest. 105 (11), 1641-1641 (2000).
- Carsten, C. G., Calton, W. C., Johanning, J. M. Elastase is not sufficient to induce experimental abdominal aortic aneurysms. J Vasc Surg. 33 (6), 1255-1255 (2001).
