Skapande av murina experimentell abdominellt aortaaneurysm med Elastase
Summary
Denna video visar hur man förmå bukaortaaneurysm (AAA) i möss via övergående intraluminal infusion av svin bukspottskörteln elastas i infrarenala delen av bukaorta. Modellen har möjlighet att lägga till bred inblick i patobiologi av AAA på grund av uppkomsten av många transgena och gener möss knockout.
Abstract
Övergående intraluminal infusion av svin bukspottskörteln elastas i infrarenala segment av bukaorta är den mest använda djurmodell av bukaortaaneurysm (AAA) ända sedan den först beskrevs hos råttor av Anidjar och kollegor. 1 Grunden för dess utveckling baseras på stört typ av elastin som observerats i AAA. Denna råtta modell har modifierats för att producera AAA i infrarenala aorta regionen möss. 2 Modellen har möjlighet att lägga till bred inblick i patobiologi av AAA på grund av uppkomsten av många transgena och gener möss knockout. Dessutom är det en livskraftig plattform för att testa potentiella terapeutiska agenter för AAA. I denna video visar vi de elastas infusionen AAA förfarande som används i vårt laboratorium.
Möss är sövda med 2,5% isofluran, och en laparotomi utförs under sterila förhållanden. Buken aortais isolerade med hjälp av ett operativsystem stereomikroskop (Leica). Efter att tillfälliga ligaturer kring den proximala och distala aorta, är en aortotomy skapas på bifurkationen med spetsen på en 30-gauge-nål. En värme-koniska segment av PE-10 polyeten slangen förs genom aortotomy och säkras. Den aorta lumen därefter perfusion i 5-15 minuter vid 100 mm Hg med saltlösning som innehåller typ I svin bukspottkörteln elastas (4,5 U / mL, Sigma Chemical Co). Efter att perfusionen kateter, är aortotomy repareras utan förträngning av lumen.
Protocol
Discussion
Tidigare studier har noterat betydande hel-till-mycket variation i AAA utveckling från olika kommersiella elastas förberedelser 3. Därför är det viktigt att övervaka produktionen massor samt att ha lämpliga kontrollgrupper för att dokumentera förmåga att förbereda för att inducera AAA.
Intressant är känsligheten för AAA utvecklingen i denna modell beror på musstam använt 3. Musen används i den aktuella videon är på C57BL / 6 stam som har konsekvent u…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Detta arbete stöddes av SCCOR bidraget "AAA Disease: Mekanismer, skiktning, och behandling" (P50 HL083800-03) från National Institutes of Health
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Type I porcine pancreatic elastase | Reagent | Sigma | E1250 | |
| polyethylene tubing (PE-10) | CLAY ADAMS | 427400 | ||
| CHANGE-A-TIP | Bovie | 18010-00 (FST) | cautery knife | |
| LEICA MZ6 | Leica | stereomicroscope | ||
| LEICA DFC290HD | Leica | USB camera | ||
| Image Pro Express ver. 6.0 | Media Cybernetics | software |
References
- Anidjar, S., Salzmann, J. L., Gentric, D. Elastase-induced experimental aneurysms in rats. Circulation. 82 (3), 973-973 (1990).
- Pyo, R., Lee, J. K., Shipley, J. M. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase B) suppresses development of experimental abdominal aortic aneurysms. J Clin Invest. 105 (11), 1641-1641 (2000).
- Carsten, C. G., Calton, W. C., Johanning, J. M. Elastase is not sufficient to induce experimental abdominal aortic aneurysms. J Vasc Surg. 33 (6), 1255-1255 (2001).
