Summary

Elastaz ile murin Deneysel Abdominal Aort Anevrizmalarının Yaratılış

Published: July 23, 2009
doi:

Summary

Bu video infrarenal abdominal aort segmentine domuz pankreatik elastaz geçici intraluminal infüzyonu ile farelerde abdominal aort anevrizması (AAA) ikna etmek için nasıl gösterir. Modeli birçok transgenik ve gen knockout farelerde ortaya çıkması nedeniyle AAA patobiyolojisi geniş bir fikir eklemek için yeteneğine sahiptir.

Abstract

Infrarenal abdominal aort segmentine domuz pankreatik elastaz Geçici intraluminal infüzyon ilk Anidjar sıçan ve meslektaşları tarafından açıklanan bu yana abdominal aort anevrizması (AAA) en yaygın olarak kullanılan hayvan modelinde kendi gelişimi için 1 mantık tabanlı elastin bozulmuş doğa AAA'ların gözlenen. Bu sıçan modelinde infrarenal aort bölgede farelerin AAA'ların üretmek için modifiye edilmiştir. 2 modeli birçok transgenik ve gen knockout farelerde ortaya çıkması nedeniyle, AAA patobiyolojisi geniş bir fikir eklemek için yeteneğine sahiptir. Ayrıca, AAA için potansiyel terapötik ajanların test etmek için geçerli bir platform. Bu video, laboratuarda kullanılan elastaz infüzyonu AAA prosedürü göstermektedir.

Fare izofluran 2.5% anestezi ve laparotomi steril koşullar altında yapılır. Karın aortais bir işletim stereomikroskopta (Leica) yardımı ile izole edilmiştir. Proksimal ve distal aorta çevresinde geçici ligatür yerleştirdikten sonra, 30-gauge bir iğne ucu ile bifurkasyon aortotomy oluşturulur. PE-10 polietilen boru ısı konik bir segment aortotomy ile tanıştırdı ve güvence altına alınmıştır. Aort lümeni daha sonra 5-15 dakika tuzlu su içeren tip I domuz pankreatik elastaz (Sigma Chemical Co 4.5 U / ml) ile 100 mm Hg perfüze. Perfüzyon kateteri çıkardıktan sonra, aortotomy lümeninde daralma olmadan onarılır.

Protocol

Fare ile anestezi inhalasyon izofluran 2.0-3.0ml / L. Karın traş ve alkol ve betadin ile temizlendi. Fare operasyon alanında sırtüstü yerleştirilir. Cerrah tarafından steril eldiven giyilir, kullanılan aletler ve sıcak boncuk sterilizatör ile sterilize edilmiştir. Uzun bir orta hat abdominal kesi yapılır. Karın içeriği abdominal aorta maruz steril gazlı bez ile karın dışında geri çekilir. Abdominal aorta, sol renal ven seviyesinden çatallanma izole edilir. <…

Discussion

Önceki çalışmalar, farklı ticari elastaz hazırlıkları 3 AAA gelişiminde önemli bir parti için çok varyasyon kaydetti var. Böylece, üretim çok izlemek için AAA'ların ikna etmek için hazırlık yeteneği belgelemek için uygun kontrol gruplarının yanı sıra kritik öneme sahiptir.

İlginçtir ki, bu modelde AAA geliştirme yatkınlığı 3 kullanılan fare suşu bağlıdır. Geçerli video kullanılan fare hatlarıyla protokolünü kullanarak AAA …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Ulusal Sağlık Enstitüleri (P50 HL083800-03): Bu çalışma SCCOR hibe "Mekanizmalar, Tabakalaşma ve Tedavi AAA Hastalığı" desteklenmiştir.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Type I porcine pancreatic elastase Reagent Sigma E1250  
polyethylene tubing (PE-10)   CLAY ADAMS 427400  
CHANGE-A-TIP   Bovie 18010-00 (FST) cautery knife
LEICA MZ6   Leica   stereomicroscope
LEICA DFC290HD   Leica   USB camera
Image Pro Express ver. 6.0   Media Cybernetics   software

References

  1. Anidjar, S., Salzmann, J. L., Gentric, D. Elastase-induced experimental aneurysms in rats. Circulation. 82 (3), 973-973 (1990).
  2. Pyo, R., Lee, J. K., Shipley, J. M. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase B) suppresses development of experimental abdominal aortic aneurysms. J Clin Invest. 105 (11), 1641-1641 (2000).
  3. Carsten, C. G., Calton, W. C., Johanning, J. M. Elastase is not sufficient to induce experimental abdominal aortic aneurysms. J Vasc Surg. 33 (6), 1255-1255 (2001).

Play Video

Cite This Article
Azuma, J., Asagami, T., Dalman, R., Tsao, P. S. Creation of Murine Experimental Abdominal Aortic Aneurysms with Elastase . J. Vis. Exp. (29), e1280, doi:10.3791/1280 (2009).

View Video