Visualiser le cœur battant Drosophile</em
Summary
Technique requise pour visualiser le cœur battant dans la larve et l'adulte<em> Drosophile</em> Sont présentés. Chaque étape de la vie nécessite une méthodologie différente.
Abstract
L'<em> Drosophile</em> Coeur a récemment émergé comme un système bon modèle pour étudier les mécanismes génétiques, cellulaires et moléculaires sous-jacents de fonction dans les coeurs myogéniques. Une étape clé dans l'examen de la fonction cardiaque chez la mouche est de trouver un moyen d'accéder au cœur d'une manière qui préserve sa fonction myogénique tout en permettant toujours l'organe cœur battant pour être observées et enregistrées. Deux méthodes différentes pour observer et enregistrer le cœur battant à la fois dans la larve et l'adulte<em> Drosophile</em> Sont décrites ici. Notre semi-intactes préparation en utilisant les mouches adultes permet une visualisation claire du cœur abdominale sans ingérence de la cuticule recouvrant pigmentées et corps gras. Pour enregistrer le cœur bat des larves, il est nécessaire d'immobiliser la larve, ce qui minimise les mouvements paroi du corps réduisant ainsi les mouvements du cœur qui ne sont pas associés avec des contractions du myocarde. Nos méthodologies de produire adulte stable et préparations coeur des larves qui peut battre pendant des heures à des taux de Hz 1-3.
Protocol
Discussion
Le modèle de drosophile s'est avérée être un puissant outil génétique qui a été utilisée pour traiter une variété de questions scientifiques allant du développement embryologique de l'apprentissage et la mémoire. Récemment cet organisme modèle polyvalent a été utilisé pour étudier la génétique de la fonction cardiaque chez la mouche. Un certain nombre de tentatives pour quantifier la physiologie cardiaque chez les adultes de drosophile sont appuyés sur les observations faites chez des mouch…
Acknowledgements
KO est soutenu par une subvention de l'American Heart Association.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Micro Dissecting Spring Scissors (curved) | Roboz | RS-5611 | Good for gross cuts (Step 3) | |
| Micro Dissecting Spring Scissors (straight) | Roboz | RS-5620 | ||
| Dumont #55 forceps | Fine Science Tools | 11295-51 | ||
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11295-10 | ||
| Glass Capillaries, 100ul | VWR | 53432-921 | ||
| Glass Capillaries, fine | Science Products | GB100T8P | ||
| Pipette Puller | Sutter Equipment | P-97 | Both horizontal and vertical pipette pullers will work | |
| Plastic tubing | Tygon R-3603 | 1/16” inner diameter | for 100μl capillaries | |
| Plastic tubing | Tygon R-3603 | 1/32” inner diameter | for small capillaries | |
| Histoacryl® tissue adhesive | B.Braun, Melsungen |
References
- Ocorr, K., Reeves, N., Wessells, R. J., Fink, M., Chen, H. -. S. V., Akasaka, T., Yasuda, S., Metzger, J., Giles, W., Posakony, J. W., Bodmer, R. KCNQ potassium channel mutations cause cardiac arrhythmias in Drosophila that mimic the effects of aging. Proc Natl Acad Sci U S A. 104, 3943-3948 (2007).
- Broadie, K. S., Bate, M. Development of the embryonic neuromuscular synapse of Drosophila melanogaster. J Neurosci. 13, 144-166 (1993).
