Electrospinning פיגומים פולימר סיבי עבור הנדסת רקמות ותרבות Cell
Summary
תהליך electrospinning פולימרים של הנדסת רקמות והתרבות תא מופנית במאמר זה. באופן ספציפי, electrospinning של macromers photoreactive עם יכולות עיבוד נוסף של photopatterning ורב פולימר electrospinning מתואר.
Abstract
כמו בתחום הנדסת רקמות מתפתחת, יש ביקוש עצום כדי לייצר חומרים מתאימים יותר וטכניקות עיבוד על מנת לענות על הדרישות (למשל, מכניקת כלי הדם) של איברים ורקמות יותר מורכב. Electrospinning היא טכניקה פופולרית כדי ליצור פיגומים סיבי המחקות את הארכיטקטורה ואת קנה המידה של גודל המטריצה תאיים הילידים. אלה פיגומים סיבי מועילות גם מצעים תרבית תאים מאז הסיבים ניתן להשתמש כדי לכוון התנהגות הסלולר, כולל התמיינות בתאי גזע (ראה סקירות נרחבות על ידי Mauck<em> Et al.</em> ו סיל<em> Et al.</em> למידע נוסף). במאמר זה, אנו מתארים את התהליך הכללי של electrospinning פולימרים כדוגמה, electrospin חומצה היאלורונית תגובתי מסוגל crosslinking עם חשיפה לאור (ראה Ifkovits<em> Et al.</em> לסקירה על חומרים photocrosslinkable). כמו כן, אנו מציגים את יכולות עיבוד נוסף כגון photopatterning ורב פולימר היווצרות הפיגום. Photopatterning יכול לשמש כדי ליצור פיגומים עם ערוצי ורב היקף נקבוביות להגדיל את חדירת הסלולר והפצה רקמות. Multi-פולימר פיגומים מועילים יותר לכוון את התכונות (מכניקה השפלה) של פיגום, כולל נקבוביות המותאמים חדירת הסלולר. יתר על כן, הטכניקות האלה ניתן להרחיב כוללים מגוון רחב של פולימרים macromers תגובתי כדי ליצור פיגומים מורכבים המספקים את הרמזים הדרושים לפיתוח מוצלח בונה רקמות מהונדסות.
Protocol
Discussion
Electrospinning שימש להכין פיגומים סיבי פולימרים. Photocrosslinkable פיגומים מבוסס על חומצה היאלורונית שימשו דוגמה להמחשה, שבו חשיפה לאור דרוש crosslinking. עם השימוש macromers תגובתי, כגון MeHA, ערוצים הוכיחו בעבר הפצה סלולרית משופרת שולבו פיגומים עם השימוש במסכה במהלך photocrosslinking כדי ליצור פיגו…
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה על ידי עמיתי American Heart Association Predoctoral כדי JLI ו National Institutes of הית מענק R01AR056624.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DAPI | Reagent | Invitrogen | D1306 | |
| I2959 | Reagent | Ciba Specialty Chemicals | ||
| PEO 200 kDa | Polysciences | 17503 | ||
| PEO 900 kDa | Reagent | Sigma | 189456 | |
| Methacryloxethyl thiocarbamoyl rhodamine B | Reagent | Polysciences | 23591-100 | Prepare stock solution in DMSO |
| Live/Dead Stain Kit | Reagent | Invitrogen | L3224 | Contains Calcein (stains live cells green) and ethidium homodime (stains red dead cells) |
| Syringe Pump | Equipment | KD Scientific | KDS100 | Two are needed for dual polymer spinning |
| Power Source | Equipment | Gamma High Voltage | ES30P-5W | Two are needed for dual polymer spinning |
| Motor | Equipment | Triem Electric Motors, Inc | 0132022-15 | Must attach to a custom built mandrel |
| Tachometer | Equipment | Network Tool Warehouse | ESI-330 | Use to monitor mandrel speed |
| Omnicure UV Spot Cure System with collimating adapter | Equipment | Exfo Life Sciences Division | S1000 | |
| Silicone Tubing | Equipment | McMaster-Carr | 51135K151 | |
| Luer Lock Female Adapter | Equipment | McMaster-Carr | 51525K293 | |
| Luer Lock Male Adapter | Equipment | McMaster-Carr | 51525K143 | |
| Needles | Equipment | Fisher Scientific | 14-825-16H | |
| Coverslips | Equipment | Corning | 2875-22 |
References
- Burdick, J. A., Chung, C., Jia, X., Randolf, M. A., Langer, R. Controlled degradation and mechanical behavior of photopolymerized hyaluronic acid networks. Biomacromolecules. 6, 386-391 (2005).
- Baker, B. M., Gee, A. O., Metter, R. B., Nathan, A. S., Marklein, R. A., Burdick, J. A., Mauck, L. R. The potential to improve cell infiltration in composite fiber-aligned electrospun scaffolds by the selective removal of sacrificial fibers. Biomaterials. 29, 2348-2358 (2008).
- Ifkovits, J. L., Burdick, J. A. Review: Photopolymerizable and degradable biomaterials for tissue engineering applications. Tissue Engineering. 13, 2369-2385 (2007).
- Khademhosseini, A., Eng, G., Yeh, J., Fukuda, J., Blumling, J., Langer, R., Burdick, J. A. Micromolding of photocrosslinkable hyaluronic acid for cell encapsulation and entrapment. J. Biomed Mater Res A. 79A, 522-532 (2006).
- Mauck, R. L., Baker, B. M., Nerurkar, N. L., Burdick, J. A., Li, W. J., Tuan, R. S., Elliott, D. M., M, D. Engineering on the Straight and Narrow: The Mechanics of Nanofibrous Assemblies for Fiber-Reinforced Tissue Regeneration. Tissue Engineering B. 15, 171-193 (2009).
- Sill, T. J., Von Recum, H. a. v. o. n. Electrospinning: applications in drug delivery and tissue engineering. Biomaterials. 29, 1989-2006 (2008).
- Sundararaghavan, H. G., Metter, R. B., Burdick, J. A. Electrospun fibrous scaffolds with multi-scale and photopatterned porosity. , (2009).
