Spinal Cord Elektrofysiologie
Summary
Een demonstratie van de isolatie van neonatale muis ruggenmerg voor elektrofysiologische studies.
Abstract
De neonatale muis ruggenmerg is een model voor het bestuderen van de ontwikkeling van neurale schakelingen en bewegingsapparaat beweging. Tonen we aan het ruggenmerg dissectie en de voorbereiding van de opname bad kunstmatige cerebrospinale vloeistof die gebruikt wordt voor de motorische studies. Eenmaal ontleed, kan het ruggenmerg ventrale zenuwwortels worden aangesloten op een registratie-elektrode naar de elektrofysiologische signalen van de centrale patroon genereren circuit record in de lumbale snoer.
Protocol
Discussion
De geïsoleerde neonatale ruggenmerg biedt een handelbaar methode van de bestudering zenuwstelsel ontwikkeling1, 2. Binnen de lumbale ruggenmerg van neonatale knaagdieren, centrale patroon genereren circuits kunnen fictieve motoriek te produceren in de aanwezigheid van neurotransmitters. Deze fictieve motoriek bestaat uit ritmische toename van de activiteit, uitbarstingen, die geproduceerd worden op 0,2 tot 0,5 Hz. Deze uitbarstingen worden georganiseerd om links-rechts afwisseling te produceren over de lengte van het s…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Samuel L. Pfaff is een professor in de Gene Expression laboratoria in het Salk Instituut voor Biologische Studies en een onderzoeker in de Howard Hughes Medical Institute. Dit werk werd ondersteund door de Christopher Reeve Foundation en Dana. Joe Belcovson, Kent Schnoeker en Mike Sullivan in Multimedia Resources aan het Salk Institute hulp geboden met fotografie en bewerken.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| KCl | P-9333 | |||
| NaCl | S-7653 | |||
| NaHCO3 | S-6297 | |||
| NaH2PO4 | S-9638 | |||
| Glucose | D-9434 | |||
| CaCl2 | C-5080 | |||
| MgSO4 | M-5921 | |||
| Large Scissors | Fine Science Tools | 14070-12 | ||
| Forceps | Fine Science Tools | 11050-10 | ||
| Fine Scissors | Fine Science Tools | 15000-10 | ||
| Insect pins | Fine Science Tools | 26002-10 | ||
| Sylgard 184 (Dow-Corning) | ||||
| 1L volumetric flask | ||||
| 100mL volumetric flask |
References
- Myers, C. P. Cholinergic input is required during embryonic development to mediate proper assembly of spinal locomotor circuits. Neuron. 46, 37-49 (2005).
- Goulding, M., Pfaff, S. L. Development of circuits that generate simple rhythmic behaviors in vertebrates. Curr Opin Neurobiol. 15 (1), 14-20 (2005).
- Gallarda, B. Segregation of axial motor and sensory pathways via heterotypic trans-axonal signaling. Science. 320, (2008).
- Gosgnach, S. V1 spinal neurons regulate the speed of vertebrate locomotor outputs. Nature. 440 (7081), 215-219 (2006).
- Lanuza, G. M., Gosgnach, S., Pierani, A., Jessell, T. M., Goulding, M. Genetic identification of spinal interneurons that coordinate left-right locomotor activity necessary for walking movements. Neuron. 42 (3), 375-386 (2004).
- Jiang, Z., Carlin, K. P., Brownstone, R. M. An in vitro functionally mature mouse spinal cord preparation for the study of spinal motor networks. Brain Res. 816 (2), 493-499 (1999).
- Ziskind-Conhaim, L., Gao, B. X., Hinckley, C. Ethanol dual modulatory actions on spontaneous postsynaptic currents in spinal motoneurons. J Neurophysiol. 89 (2), 806-813 (2003).
- Tabak, J., Rinzel, J., O’Donovan, M. J. The role of activity-dependent network depression in the expression and self-regulation of spontaneous activity in the developing spinal cord. J Neurosci. 21 (22), 8966-8978 (2001).
- Chub, N., Mentis, G. Z., O’Donovan, M. J. Chloride-sensitive MEQ fluorescence in chick embryo motoneurons following manipulations of chloride and during spontaneous network activity. J Neurophysiol. 95 (1), 323-330 (2006).
