Spinal Cord Elektrophysiologie
Summary
Eine Demonstration der Isolierung von Neugeborenen Maus Rückenmark für elektrophysiologische Untersuchungen.
Abstract
Das Neugeborenen-Maus Rückenmark ist ein Modell für die Untersuchung der Entwicklung von neuronalen Schaltungen und Fortbewegung. Wir zeigen das Rückenmark Dissektion und Vorbereitung der Aufnahme Bad künstlichen Liquor des Bewegungsapparates Studien verwendet. Nachdem seziert, kann das Rückenmark ventral Nervenwurzeln, um eine Aufnahme Elektrode angebracht werden, um die elektrophysiologische Signale des zentralen Muster erzeugen Schaltung innerhalb Lendenmark aufzunehmen.
Protocol
Discussion
Die isolierten neonatalen Rückenmark stellt eine gefügig Methode zur Untersuchung des Nervensystems Entwicklung1, 2. Im Lumbalmark der Neugeborenen-Nagetiere, kann central pattern Erzeugung Schaltung fiktiven Fortbewegung in Gegenwart von Neurotransmittern zu produzieren. Diese fiktive Lokomotion besteht aus rhythmischen Anstieg der Aktivität, Bursts, dass bei 0,2 bis 0,5 Hz erzeugt werden. Diese Ausbrüche sind so organisiert, links-rechts abwechselnd entlang der Länge des Kabels und der Beuger-Strecker Wechsel (ip…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Samuel L. Pfaff ist ein Professor in der Genexpression Laboratories am Salk Institute for Biological Studies und ein Investigator in der Howard Hughes Medical Institute. Diese Arbeit wurde von der Christopher and Dana Reeve Foundation unterstützt. Joe Belcovson, Kent Schnoeker und Mike Sullivan in Multimedia-Ressourcen am Salk Institute unterstützte mit der Fotografie und Bearbeitung.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| KCl | P-9333 | |||
| NaCl | S-7653 | |||
| NaHCO3 | S-6297 | |||
| NaH2PO4 | S-9638 | |||
| Glucose | D-9434 | |||
| CaCl2 | C-5080 | |||
| MgSO4 | M-5921 | |||
| Large Scissors | Fine Science Tools | 14070-12 | ||
| Forceps | Fine Science Tools | 11050-10 | ||
| Fine Scissors | Fine Science Tools | 15000-10 | ||
| Insect pins | Fine Science Tools | 26002-10 | ||
| Sylgard 184 (Dow-Corning) | ||||
| 1L volumetric flask | ||||
| 100mL volumetric flask |
References
- Myers, C. P. Cholinergic input is required during embryonic development to mediate proper assembly of spinal locomotor circuits. Neuron. 46, 37-49 (2005).
- Goulding, M., Pfaff, S. L. Development of circuits that generate simple rhythmic behaviors in vertebrates. Curr Opin Neurobiol. 15 (1), 14-20 (2005).
- Gallarda, B. Segregation of axial motor and sensory pathways via heterotypic trans-axonal signaling. Science. 320, (2008).
- Gosgnach, S. V1 spinal neurons regulate the speed of vertebrate locomotor outputs. Nature. 440 (7081), 215-219 (2006).
- Lanuza, G. M., Gosgnach, S., Pierani, A., Jessell, T. M., Goulding, M. Genetic identification of spinal interneurons that coordinate left-right locomotor activity necessary for walking movements. Neuron. 42 (3), 375-386 (2004).
- Jiang, Z., Carlin, K. P., Brownstone, R. M. An in vitro functionally mature mouse spinal cord preparation for the study of spinal motor networks. Brain Res. 816 (2), 493-499 (1999).
- Ziskind-Conhaim, L., Gao, B. X., Hinckley, C. Ethanol dual modulatory actions on spontaneous postsynaptic currents in spinal motoneurons. J Neurophysiol. 89 (2), 806-813 (2003).
- Tabak, J., Rinzel, J., O’Donovan, M. J. The role of activity-dependent network depression in the expression and self-regulation of spontaneous activity in the developing spinal cord. J Neurosci. 21 (22), 8966-8978 (2001).
- Chub, N., Mentis, G. Z., O’Donovan, M. J. Chloride-sensitive MEQ fluorescence in chick embryo motoneurons following manipulations of chloride and during spontaneous network activity. J Neurophysiol. 95 (1), 323-330 (2006).
