Denna video visar hur du kapsla in och kultur cancerceller i PuraMatrix, en kommersiellt tillgänglig självaggregerande peptid gel.
Ökande bevis tyder på att cellerna odling cancer i tre dimensioner mer exakt rekapitulerar komplexiteten i tumörbiologi. Många av dessa modeller använder färdigberedda basalmembranet som härrör från djur som innehåller en varierande mängd tillväxtfaktorer och cytokiner som kan påverka tillväxten av dessa modeller cellkultur. Här beskriver vi i detalj beredning och användning av PuraMatrix, en kommersiellt tillgänglig självaggregerande peptid gel som saknar animaliska material och patogener till att samla och sprida äggstockscancer linje cancercell, OVCAR-5. Vi börjar med att beskriva hur man kan förbereda PuraMatrix före användning. Därefter visar vi hur man korrekt att blanda PuraMatrix och cellsuspension att kapsla in cellerna i hydrogel. Vid tillägg av media cellodling eller injektion i en fysiologisk miljö, peptiden del av PuraMatrix snabbt själv monterar i en 3D-hydrogel som uppvisar en nanometer struktur skala fibrösa med en genomsnittlig porstorlek 500-200 nm<sup> 1</sup>. Dessutom visar vi hur man propagerar kulturer som odlats i inkapslad PuraMatrix. När inkapslade i PuraMatrix, OVCAR-5 celler montera in tredimensionella acinar strukturer som mer liknar den morfologi micrometastatic knutor ses vid klinisk än cellslager in vitro-modeller. Använda konfokalmikroskopi vi illustrerar uppkomsten av representativa OVCAR-5 celler inkapslade i PuraMatrix dag 1, 3, 5 och 7 efter plätering. Användningen av PuraMatrix till celler kultur cancer bör förbättra vår förståelse av sjukdomen och ge oss möjlighet att bedöma behandlingssvar hos mer kliniskt prediktiv modell system.