Summary

Aortica costrizione trasversale nei topi

Published: April 21, 2010
doi:

Summary

Restringimento aortico trasversale (TAC) nel topo è un modello comunemente usato sperimentale per studiare meccanismi che sottendono l'ipertrofia cardiaca e scompenso cardiaco sviluppo. Qui si descrivono le modalità per costrizione dell'aorta per creare un grado riproducibile di ipertrofia cardiaca nei topi.

Abstract

Restringimento aortico trasversale (TAC) nel topo è un modello comunemente usato sperimentale per un sovraccarico di pressione indotta ipertrofia cardiaca e scompenso cardiaco.<sup> 1</sup> TAC porta inizialmente a ipertrofia compensato del cuore, che spesso è associato ad un miglioramento temporaneo della contrattilità cardiaca. Nel corso del tempo, però, la risposta al cronico sovraccarico emodinamico diventa disadattamento, con conseguente dilatazione cardiaca e scompenso cardiaco.<sup> 2</sup> Il modello murino TAC è stato convalidato da Rockman<em> Et al</em>.<sup> 1</sup>, E da allora è stato ampiamente utilizzato come uno strumento prezioso per imitare umana malattie cardiovascolari e chiarire fondamentali processi di segnalazione coinvolte nella risposta ipertrofica cardiaca ed insufficienza cardiaca sviluppo. Rispetto ad altri modelli sperimentali di insufficienza cardiaca, come ad esempio l'occlusione completa della discendente anteriore sinistra (LAD) delle arterie coronarie, TAC offre un modello più riproducibile di ipertrofia cardiaca e un corso di tempo più graduale per lo sviluppo di insufficienza cardiaca. Qui, descriviamo un passo-passo per eseguire procedura chirurgica TAC nei topi. Per determinare il livello di sovraccarico di pressione prodotta dalla legatura aortica, una sonda ad alta frequenza Doppler viene utilizzato per misurare il rapporto tra velocità di flusso sanguigno nelle arterie carotide destra e sinistra.<sup> 3, 4</sup> Con i tassi di sopravvivenza chirurgica del 80-90%, banding aortico trasversale è una tecnica efficace per indurre l'ipertrofia ventricolare sinistra ed insufficienza cardiaca nei topi.

Protocol

Parte 1: Preparazione del campo operatorio Il campo operativo è disinfettata con il 75% di alcool isopropilico. Assicurarsi che il pad di riscaldamento è acceso e alla giusta temperatura. Un sistema consigliato è una pompa Gaymar acqua circolante collegato ad un pad terapia che viene mantenuta a 37 ° C ± 1 ° C. E 'importante mantenere la temperatura corporea normale durante l'intervento chirurgico per evitare una rapida diminuzione della frequenza cardiaca. Strumenti chirurgi…

Discussion

TAC, che imita la stenosi aortica umana, è un metodo comune per indurre l'ipertrofia cardiaca e insufficienza cardiaca nei topi. Siti alternativi per costrizione aortica includono l'aorta ascendente e addominale. Restringimento dell'aorta ascendente fornisce un sovraccarico estrema e più rapido del ventricolo sinistro (LV). Al contrario, la costrizione dell'aorta addominale lascia intatta una porzione più ampia della circolazione come mezzo di eventuale risarcimento. 8 Perciò, TAC è spess…

Acknowledgements

XHTW è un WM Keck Foundation Scholar Illustri giovani nella ricerca medica, ed è anche supportato da NIH / NHLBI concede R01-R01-HL089598 e R01HL091947 e Distrofia Muscolare associazione concedere # 69238. RJvO è il destinatario della Fellowship dell'American Physiological Society 2008-2010 post-dottorato in Physiological Genomics. Questo lavoro è supportato anche in parte dall'Alleanza Fondation Leducq per CaMKII segnalazione di Cuore.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Gaymar T/pump   Harvard Apparatus Model TP-500 Circulating water pump
Temp. therapy pads   Harvard Apparatus 60-3414  
Hot bead sterilizer   Fine Science Tools 18000-45  
Blunt scissors   Roboz RS-5980  
Angled spring scissors   Roboz RS-5668  
Chest retractor   Fine Science Tools 17002-02  
Course curved forceps   Roboz RS-5138  
Dumont fine 45° angled forceps   Fine Science Tools 11253-25  
Needle holder   Fine Science Tools 12565-14  
Electric shaver   General Electric   For shaving mouse fur
PE 90 tubing   BD 427420 For intubation
MiniVent (ventilator)   Harvard Apparatus Type 845  
Betadine   Fisher 19-027132 May be purchased at medical supply store
Sterile gloves   Mckesson 20-1565  
Stereo microscope   Unico ZM186  
6-0 silk suture   Fine Science Tools 18020-60  
27 ½ gauge needle   BD 305109  
6-0 prolene suture   Mckesson 3286  
Buprenorphine   Institutional Animal Facility    

References

  1. Rockman, H. A., Ross, R. S., Harris, A. N., Knowlton, K. U., Steinhelper, M. E., Field, L. J., Ross, J., Chein, K. R. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 88, 8277-8281 (1991).
  2. Heineke, J., Molkentin, J. D. Regulation of cardiac hypertrophy by intracellular signaling pathways. Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 7, 589-600 (2006).
  3. Hartley, C. J., Reddy, A. K., Madala, S., Michael, L. H., Entman, M. L., Taffett, G. E. Doppler estimation of reduced coronary flow reserve in mice with pressure overload cardiac hypertrophy. Ultrasound Med. Biol. 34, 892-901 (2008).
  4. Reddy, A. K., Taffett, G. E., Li, Y. -. H., Lim, S. -. W., Pham, T. T., Pocius, J. S., Entman, M. L., Michael, L. H., Hartley, C. J. Doppler signal processing for use in mice: applications. IEEE Trans. Biomed. Eng. 52, 1771-1783 (2005).
  5. Li, Y. -. H., Reddy, A. K., Ochoa, L. N., Pham, T. T., Hartley, C. J., Micheal, L. H., Entman, M. L., Taffett, G. E. Effect of age on peripheral vascular response to transverse aortic banding in mice. J. Gerontol. 58A, 895-899 (2003).
  6. Bourajjaj, M., Armand, A. S., Martins, d. a. C. o. s. t. a., Weijts, P. A., Nagel, B. V. a. n. d. e. r., Heeneman, R., Wehrens, S., Windt, X. H. D. e., J, L. NFATc2 is a necessary mediator of calcineurin-dependent cardiac hypertrophy and heart failure. J. Biol. Chem. 28, 22295-22303 (2008).
  7. Oort, R. J. v. a. n., Respress, J. L., Li, N., Reynolds, C., Almeida, A. C. D. e., Skapura, D. G., Windt, L. J. D. e., Wehrens, X. H. Accelerated development of pressure overload induced cardiac hypertrophy and dysfunction in an RyR2-R176Q knockin mouse model. Hypertension. 55, (2010).
  8. Tarnavski, O., McMullen, J. R., Schinke, M., Nie, Q., Kong, S., Izumo, S. Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies. Physiol Genomics. 16, 349-360 (2004).
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Cite This Article
deAlmeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. Transverse Aortic Constriction in Mice. J. Vis. Exp. (38), e1729, doi:10.3791/1729 (2010).

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