Summary

تصنيع وزرع قطب كهربائي في Aplysia californica لتسجيلات متعدد القنوات العصبية والعضلات في الحيوانات ، ويتصرف بحرية سليمة

Published: June 04, 2010
doi:

Summary

يوصف تقنية لزرع four<em> في الجسم الحي</em> كهربائية لرصد مراقبة السلوك العصبي العضلي في التغذية<em> Aplysia californica</em>.

Abstract

التسجيل من الأعصاب والعضلات الرئيسية لل<em> Aplysia</em> التغذية خلال السلوك يسمح لنا لدراسة أنماط السيطرة العصبية في حيوان سليم. في الوقت نفسه من تسجيل العديد من الأعصاب والعضلات يعطينا معلومات دقيقة حول توقيت النشاط العصبي. وقد عملت وسائل تسجيل سابقة للقطبين ، ولكن دراسة الأعصاب أو العضلات الإضافية المطلوبة ، والجمع بين المتوسط ​​تسجيلات متعددة من الحيوانات ، الأمر الذي جعل من الصعب تحديد التفاصيل الدقيقة للتوقيت والإلغاء ، وذلك بسبب التباين من الاستجابة إلى الاستجابة ، ومن حيوان إلى حيوان. زرع أقطاب كهربائية four فرد لديه نسبة النجاح منخفضة للغاية نظرا لتشكيل الالتصاقات التي تمنع الحيوانات من أداء الحركات التغذية الطبيعية. طورنا طريقة جديدة لتصنيع الكهربائي الذي يقلل من الجزء الأكبر من أقطاب داخل الحيوان السماح للحركات التغذية الطبيعية. باستخدام مزيج من المواد اللاصقة لتوصيل الأقطاب الكهربائية النتائج في العزل أكثر موثوقية من القطب الذي يستمر لفترة أطول ، مما يجعل من الممكن أن يسجل لفترات ما دام اسبوع. ويمكن توسيع نطاق تقنية التصنيع التي وصفنا لدمج عدة أقطاب كهربائية إضافية ، ويمكن أن يطبق على الحيوانات الفقارية.

Protocol

1. التصنيع الكهربائي لإنشاء قطب ، واستخدام المقص لقطع قطعة من المينا المغلفة سلك قطره 0.001 بوصة الفولاذ المقاوم للصدأ حوالي 2 أقدام طويلة. نعلق كرة صغيرة من المعجون على كل طرف من السلك ، سلك أضعاف في النصف ، وتدور في تاري?…

Discussion

ومن المبتكرات الرئيسية التي جعلت من هذه التسجيلات الناجحة هي التي تجمع بين الأقطاب في كابل واحد. وقد استخدمت تسجيلات القطب اثنين من قبل ، ولكن التوسع إلى أربعة أقطاب الفردية أسفرت عن تشكيل الالتصاقات الجراحية التي كثيرا ما تمنع الحيوان من صنع الحركات التغذية الطبيع?…

Acknowledgements

نحن نعترف بامتنان الدعم من المعاهد الوطنية للصحة (لمجلس القضاء الأعلى NS047073). ونحن ممتنون لكيهل كاترين لتجاربها في وقت مبكر مع كويك السيل ، والذي شجعنا على استخدامه لطلبنا.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Enamel coated stainless steel wire   California Fine Wire   0.001D, coating h
Household Silicone II Glue   GE    
Kwik-Sil Adhesive   WPI    
Duro Qwik-Gel superglue   Henkel corp.    
A-M Systems model 1700 amplifier   A-M Systems   Filter settings:100-1000Hz nerves,10-1000Hz I2 muscle
Axoscope 10.1   Molecular Devices    
Gold Connector Pins   Bulgin SA3148/1  
Gold Connector Sockets   Bulgin SA3149/1  

References

  1. Lu, H., Chestek, C. A., Shaw, K. M., Chiel, H. J. Selective extracellular stimulation of individual neurons in ganglia. J. Neural Eng. 5, 287-309 (2008).
  2. Morton, D. W., Chiel, H. J. In vivo buccal nerve activity that distinguishes ingestion from rejection can be used to predict behavioral transitions in Aplysia. J Comp. Physiol. A. 172, 17-32 (1993).
  3. Warman, E. N., Chiel, H. J. A new technique for chronic single extracellular recording in freely behaving animals using pipette electrodes. J. Neurosci. Methods. 57, 161-169 (1995).
  4. Ye, H., Morton, D. W., Chiel, H. J., J, H. nbsp;Neuromechanics of multifunctionality during rejection in Aplysia californica. J. Neurosci. 26, 10743-10755 (2006).
check_url/kr/1791?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Cullins, M. J., Chiel, H. J. Electrode Fabrication and Implantation in Aplysia californica for Multi-channel Neural and Muscular Recordings in Intact, Freely Behaving Animals. J. Vis. Exp. (40), e1791, doi:10.3791/1791 (2010).

View Video