אלקטרודה ייצור השרשה ב Aplysia californica עבור הקלטות רב ערוצי עצבית ושרירי ב, חיים שלמים חופשי מתנהג
Summary
הטכניקה מתוארת עבור השתלה four<em> In vivo</em> אלקטרודות לפקח על השליטה neuromuscular התנהגות האכלה<em> Aplysia californica</em>.
Abstract
הקלטה של העצבים והשרירים העיקריים של<em> Aplysia</em> במהלך התנהגות האכלה מאפשרת לנו ללמוד את דפוסי השליטה העצבית חיים שלמים. במקביל להקלטה מתוך העצבים והשרירים מרובים נותן לנו מידע מדויק על העיתוי של פעילות עצבית. שיטות הקלטה קודמים עבד עבור שתי אלקטרודות, אבל את המחקר של עצבים או שרירים נוסף נדרש שילוב ממוצעים של ההקלטות של בעלי חיים רבים, אשר הקשו על מנת לקבוע הפרטים הקטנים של עיתוי בהדרגה, בגלל השתנות מן כתגובה, ומתוך חיה לחיה. השתלת ארבע אלקטרודות אדם בעל שיעור הצלחה נמוך מאוד עקב היווצרות של הידבקויות המונעות חיות מלבצע תנועות האכלה רגילה. פיתחנו שיטה חדשה של ייצור אלקטרודה המפחיתה את חלק הארי של האלקטרודות בתוך החיה ומאפשר תנועות האכלה רגילה. באמצעות שילוב של דבקים לצרף את התוצאות אלקטרודות בידוד אמין יותר של האלקטרודה אשר נמשך זמן רב יותר, כך שניתן להקליט לתקופות עוד שבוע. טכניקת ייצור שאנו מתארים ניתן יהיה להרחיב לשלב אלקטרודות נוספות אחדות, תהיה ישימה בעלי חיים בעלי חוליות.
Protocol
Discussion
חדשנות מפתח שהפכה הקלטות הללו מוצלח הוא שילוב של אלקטרודות לתוך כבל אחד. שתי הקלטות אלקטרודה שימשו בעבר, אך מתרחבת עד ארבע אלקטרודות הפרט הביאה להיווצרות הידבקויות כירורגית שלעתים קרובות מנעו מן החי עושה תנועות האכלה רגילה. השילוב בין האלקטרודות לתוך כבל אחד מקטין א…
Acknowledgements
בהכרת תודה אנו מודים תמיכה מ-NIH (NS047073 אל בג"ץ). כמו כן, אנו מודים קתרין Kehl לניסויים המוקדמות שלה עם Kwik-סיל, אשר עודדו אותנו להשתמש בו עבור היישום שלנו.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Enamel coated stainless steel wire | California Fine Wire | 0.001D, coating h | ||
| Household Silicone II Glue | GE | |||
| Kwik-Sil Adhesive | WPI | |||
| Duro Qwik-Gel superglue | Henkel corp. | |||
| A-M Systems model 1700 amplifier | A-M Systems | Filter settings:100-1000Hz nerves,10-1000Hz I2 muscle | ||
| Axoscope 10.1 | Molecular Devices | |||
| Gold Connector Pins | Bulgin | SA3148/1 | ||
| Gold Connector Sockets | Bulgin | SA3149/1 |
References
- Lu, H., Chestek, C. A., Shaw, K. M., Chiel, H. J. Selective extracellular stimulation of individual neurons in ganglia. J. Neural Eng. 5, 287-309 (2008).
- Morton, D. W., Chiel, H. J. In vivo buccal nerve activity that distinguishes ingestion from rejection can be used to predict behavioral transitions in Aplysia. J Comp. Physiol. A. 172, 17-32 (1993).
- Warman, E. N., Chiel, H. J. A new technique for chronic single extracellular recording in freely behaving animals using pipette electrodes. J. Neurosci. Methods. 57, 161-169 (1995).
- Ye, H., Morton, D. W., Chiel, H. J., J, H. nbsp;Neuromechanics of multifunctionality during rejection in Aplysia californica. J. Neurosci. 26, 10743-10755 (2006).
