Grabaciones multielectrodo matriz del epitelio vomeronasal

Summary

Multielectrodo array (MEA) grabaciones de proporcionar un método para estudiar la actividad eléctrica de las grandes poblaciones de neuronas. Aquí se presentan los detalles de una preparación de MEA para grabar desde el epitelio vomeronasal del ratón al mismo tiempo estimular el tejido.

Abstract

Entender los circuitos neuronales requiere de métodos de registro de las neuronas de manera simultánea. Para<em> In vitro</em> Estudios, una tecnología actualmente disponible es amplia plana multielectrodo (MEA) de grabación. Aquí se documenta el uso de los acuerdos ambientales multilaterales para estudiar el ratón órgano vomeronasal (OVN), que desempeña un papel esencial en la detección de las feromonas y señales sociales a través de una diversa población de neuronas sensoriales que expresan cientos de tipos de receptores. La combinación de grabación de MEA con un controlador robótico líquido para suministrar estímulos químicos, las respuestas sensoriales de una gran y diversa población de neuronas se pueden grabar. La preparación que nos permite eliminar el neuroepitelio intacta del VNO en el ratón y estimular con una batería de productos químicos o ligandos potenciales, mientras que el control de la actividad eléctrica de las neuronas durante varias horas. Por lo tanto, esta técnica sirve como un método útil para evaluar la actividad del ligando, así como explorar las propiedades de las neuronas receptoras. Se presentan las técnicas necesarias para preparar el epitelio vomeronasal, grabación de MEA, y la estimulación química.

Protocol

Parte 1. Instrumentación de grabación eléctrica Utilizamos una amplia multielectrodo planar (ALA Scientific Instruments) con 10 micras electrodos planos aislados de nitruro de titanio con nitruro de silicio. 60 electrodos están dispuestos en dos campos que consiste en una cuadrícula de 5×6 con el espaciamiento de centro a centro de 30 micras. (Otras configuraciones son posibles, los electrodos con una superficie de grabación de 10 micras de diámetro son mejores que los electrodos más grandes en térmi…

Discussion

Grabaciones multielectrodo conjunto nos permiten la posibilidad de monitorear la actividad simultánea de una gran población de neuronas. Esta es una herramienta útil para probar las propiedades de un sistema sensorial, en concreto el VNO. A diferencia del sistema olfatorio principal, el OVN detecta estímulos en fase líquida. Además, el VNO es un tejido heterogéneo. Hay aproximadamente 300 tipos diferentes de receptores en el ratón ^1, presumiblemente con perfiles de respuesta diferente. MEA grabaciones…