Восстановление мыши ооцитов

Summary

Этот протокол иллюстрирует технику для извлечения яйцеклеток или на ранней стадии оплодотворения эмбрионы из яйцевода мышей. Способность идентифицировать infindibulum и вставьте тупой иглой в конце важно правильно выполнять процедуры.

Abstract

На сегодняшний день только несколько исследований сообщили об успешном проведении манипуляций Реготузсиз эмбриогенеза или репродуктивной биологии. Вместе с Реготузсиз генетического фонда Центр (http://stkctr.biol.sc.edu), мы характеризующие основные различия, необходимые для разработки этой системы. Основной задачей было оптимизировать ооцитов / начале поиска эмбриона.

Protocol

Эмбрионов / ооцитов поиска По крайней мере, за два часа до извлечения эмбрионов / ооцитов, KSOM находится в 37 ° C CO 2 инкубатора и FHM должна быть талой с ° -20. Стеклянную посуду, содержащие три вогнутые неглубоких скважин используется для дома капель KSOM в инкубаторе. Чтобы избежать …

Discussion

В этой статье мы покажем извлечения ооцитов от овуляции-индуцированного (superovulated) Реготузсиз. Использование суперовуляции (в отличие от природных эстрального цикла) является общим в связи с гораздо большей полученные числа. Тем не менее, осторожность должны быть приняты в интерпретации результат…

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Flushing needle	Tool	Zephyrtronics	ZT5-130-L	30 gauge blunt
Forceps (2)	Tool	Roboz	RS-5060
Peromyscus	Animal	Peromyscus Genetic Stock Center
Scissors	Tool	Roboz	RS-5880
FHM HEPES Buffered Media	Reagent	Specialty Media	MR-025-d
KSOM Embryo Culture Medium (5×10 ml)	Reagent	Specialty Media	MR-020P-5F
Mouth Pipette	Tool			Pulled from glass capillaries and attached to rubber tubing
Oocyte holding dish	Tool			Glass container with concave divets