आंशिक Ligation द्वारा अशांत प्रवाह प्रेरित माउस मन्या धमनी में Atherosclerosis और मन्या endothelium से एक शाही सेना के अलगाव की सरल विधि का एक माडल
Summary
यह एक आंशिक मन्या ligation सर्जरी, जो intraplaque माउस आम मन्या धमनी में नव – vascularization (चार सप्ताह में) के साथ परेशान प्रवाह की स्थिति और बाद atherosclerosis के विकास (दो हफ्तों में) का कारण बनता है वर्णन किया गया है. हम भी मन्या intima से शाही सेना अलगाव के एक उपन्यास विधि का वर्णन है, उच्च शुद्धता endothelial शाही सेना प्रदान.
Abstract
प्रसिद्ध निकट सहयोग के बावजूद, प्रत्यक्ष atherogenesis परेशान प्रवाह जोड़ने सबूत का अभाव रहा है. हमने हाल ही में मन्या आंशिक ligation के तरीकों का एक संशोधित संस्करण का इस्तेमाल किया है [1,2] को दिखाने के लिए कि यह तीव्रता कम और oscillatory प्रवाह की स्थिति, माउस आम मन्या धमनी में परेशान प्रवाह के दो प्रमुख विशेषताओं, लाती है. इस मॉडल का उपयोग करना, हम प्रत्यक्ष प्रमाण है कि परेशान प्रवाह वास्तव में अपोलीपोप्रोटीन ई पीटकर माउस में तेजी से और मजबूत atherosclerosis के विकास के लिए [3] सुराग प्रदान की है. हम भी उच्च शुद्धता के साथ माउस मन्या [3] intima से endothelial शाही सेना तैयार करने की एक विधि विकसित की. इस माउस मॉडल और पद्धति का उपयोग करके, हमने पाया है कि आंशिक ligation के एक सप्ताह में endothelial रोग का कारण बनता है, मजबूत और तेजी से दो सप्ताह में intraplaque neovascularization जैसे जटिल घाव गठन के चार सप्ताह के द्वारा सुविधाओं के साथ एक hyperlipidemic माउस मॉडल में atheroma गठन के द्वारा पीछा किया. यह तेजी<em> Vivo में</em> मॉडल और endothelial शाही सेना की तैयारी विधि आणविक नाड़ी जीव विज्ञान और रोगों के प्रवाह पर निर्भर विनियमन अंतर्निहित तंत्र को निर्धारित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. इसके अलावा, यह विभिन्न चिकित्सकीय हस्तक्षेप लक्ष्यीकरण endothelial और अध्ययन काफी कम अवधि में शिथिलता atherosclerosis के परीक्षण के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
Protocol
Discussion
इस प्रक्रिया में, बाह्य मन्या, आंतरिक मन्या, पश्चकपाल धमनी और बेहतर थाइरोइड धमनी सहित सभी आम मन्या की शाखाओं की उचित पहचान आवश्यक है. यह भी प्रवाह अल्ट्रासाउंड का उपयोग कर के रूप में प्रदर्शन पैटर्न को ?…
Acknowledgements
यह काम NIH अनुदान HL87012 (HJ) HL75209 (HJ), UO1HL80711 (DH, महानिदेशक, HJ) और वर्ल्ड क्लास यूनिवर्सिटी परियोजना (HJ) से विज्ञान, प्रौद्योगिकी और दक्षिण कोरिया के शिक्षा मंत्रालय से धन के द्वारा समर्थित किया गया था.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Normal Saline (0.9% sodium chloride) | Baxter | 2B1323 | ||
| Insulin syringe (3/10 ml 29g syringe) | Tyco Health care | 8881600145 | ||
| HBSS | Cellgro, Mediatech, Inc. | 21-023 | ||
| miRNeasy mini kit (including, QIAzol) | QIAGEN | 217004 | ||
| Vevo 770 High-Resolution Micro-Imaging System | Visualsonics | a.Visualsonics 770 system b.Imaging stage c.Vevo integrated rail system d.RMV scan head for mice |
or similar system | |
| 6-0 Silk Suture, sterile | Covidien | s-1172 c2 | ||
| Small scissors | Roboz | RS-5675 | or similar | |
| Dissecting Forceps | Roboz | RS-5005 | or similar | |
| Tissue Mend II | Webster Vet Supply | 07-856-7946 |
References
- Korshunov, V. A., Berk, B. C. Flow-induced vascular remodeling in the mouse: a model for carotid intima-media thickening. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 23 (12), 2185-2191 (2003).
- Sullivan, C. J., Hoying, J. B. Flow-dependent remodeling in the carotid artery of fibroblast growth factor-2 knockout mice. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 22 (7), 1100-1105 (2002).
- Nam, D. Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297 (4), H1535-H1543 (2009).
