Proboscide Estensione di risposta (PER) Assay in Drosophila
Summary
Risposta estensione proboscide o per un comportamento saggio gusto che è stato usato nelle mosche così come nelle api. Quando la proboscide entra in contatto con una sostanza attrattiva, la mosca estende la sua proboscide a consumare la sostanza. Le soluzioni di zuccheri diversi sono molto attraenti per il volo.
Abstract
Risposta estensione proboscide (PER) è un test comportamento gusto che è stato usato nelle mosche così come nelle api.
Sulla superficie della bocca della mosca (labello), ci sono strutture simili a capelli chiamato sensilli che ospita i neuroni gusto. Quando una sostanza entra in contatto interessante per il labello, la mosca estende la sua proboscide di consumare il materiale. Estensione proboscide di risposta (PER) saggio misura questa risposta comportamento gusto, ed è un metodo utile per conoscere le preferenze alimentari in una mosca. Le soluzioni di zuccheri diversi, come saccarosio, glucosio e fruttosio, sono molto attraenti per il volo. L'effetto di sostanze avversive può anche essere testati come la riduzione del PER se mescolato in una soluzione dolce.
Nonostante la semplicità della procedura di base, ci sono molte cose che possono impedirne il funzionamento. Uno dei fattori che richiede attenzione è stato reattivo della mosca. Il tempo di morire di fame necessaria per portare al volo il proprio ordine di risposta varia drasticamente da 36 a 72 ore. Abbiamo stabilito una serie di controlli per valutare lo stato della mosca e che permette lo screening di singoli animali che non rispondono o iper-reattivo. Un altro fattore importante è il livello di impatto e la posizione del contatto con il labello, che sarebbe difficile descrivere a parole. Questa presentazione video dimostra tutti questi insieme a diversi altri miglioramenti che aumentano la riproducibilità di questo metodo.
Protocol
Discussion
In questa presentazione, abbiamo superato tutti i passaggi per il dosaggio risposta estensione proboscide. Il metodo sembra abbastanza semplice, ma come in molti altri comportamenti saggi, tante piccole cose possono impedire il test di funzionare. Siamo passati attraverso molte fasi in modo tale che richiede una particolare attenzione. Qui, sottolineare nuovamente alcuni dei fattori più importanti.
Uno di questi fattori è la forma dello stoppino. Ho mostrato alcuni degli esempi molto buono, ma naturalmente, in realtà tutto sarebb…
Acknowledgements
Ringraziamo Paul Graham per servire come un uomo telecamera nel video di presentazione.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| HDR-HC1 | Camera | Sony | ||
| SMZ800 | Microscope | Nikon | ||
| P-IBSS | Camera Adapter | Nikon | ||
| 1x DC10LN | Camera Adapter | OPTEM | ||
| 257010 | Camera Adapter | OPTEM | ||
| TREKKER Mk2 | Tripod | BENBO | ||
| Gorillapod SLR | Tripod | Joby | ||
| iMac G5 | Computer | Apple | ||
| Power Mac G5 | Computer | Apple | ||
| iMovie | Software | Apple | ||
| MPEG Streamclip | Software | SQUARED 5 |
