Snabb Homogen detektion av biologiska analyser med magnetkamera System Modulation biosensing
Summary
Magnetisk modulering biosensing systemet utnyttjas för att snabbt, lyhört och enkelt upptäcka biologiska analyser, såsom DNA-molekyler och proteiner.
Abstract
En magnetisk modulering biosensing system (MMB) [1,2] snabbt och homogent upptäcks biologiska mål vid låga koncentrationer utan tvätt eller separation steg. När IL-8 mål var närvarande, en "sandwich'-baserad analys fäst magnetiska kulor med IL-8 fånga antikroppar mot streptavidin kombination fluorescerande proteinet via IL-8 mål och en biotinylerad IL-8 antikropp. Den magnetiska kulor manövreras i oscillerande rörelse med hjälp av en växlande magnetfältsgradienten genom två elektromagnetiska poler. Den fluorescerande proteiner, som är knuten till magnetiska kulor sammanställs till att upptäcka området och deras rörelser in och ut ur en ortogonal laserstråle ger en periodisk fluorescerande signal som demodulerade synkrona upptäckt. Den magnetiska modulering biosensing system som tidigare användes för att upptäcka kodande sekvenser av de icke-strukturella Ibaraki virusprotein 3 (NS3) kompletterande DNA (cDNA) [2]. De tekniker som demonstreras i detta arbete för extern manipulation och kondensation av partiklar kan användas för andra tillämpningar, t.ex. leverans av magnetiskt kopplade läkemedel<em> In vivo</em> Eller förbättra kontrasten för<em> In vivo</em> Bildprogram.
Protocol
Discussion
Sammanfattningsvis visade vi att MMB systemet kan användas för att upptäcka förekomsten av IL-8 mål vid låga koncentrationer (0,5 pico-gram är detektionsgränsen av Bio-Plex Precision Pro cytokin-analyser [3,4]). Förmågan hos systemet är inte begränsat till IL-8 och kan användas för att upptäcka andra proteiner. Fördelarna med MMB systemet är förmågan att upptäcka mål snabbt och utan separation eller tvätt steg. Därför underlättar det att upptäcka processen och gör att systemet kan användas i …
Acknowledgements
Detta arbete stöddes delvis av Ishaya Horowitz fonden.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Bio-Plex Pro Human Cytokine IL-8 set | Bio-Rad | 171-B5008M | ||
| Recombinant human IL-8 target | Thermo Scientific | R202625 | ||
| Biotinylated monoclonal mouse anti human IL-8 antibody G265-8 | BD Biosciences | 554718 | ||
| Streptavidin coupled fluorescent protein | Bio-Rad | Streptavidin PE |
References
- Danielli, A., Arie, A., Porat, N., Ehrlich, M. Detection of fluorescent-labeled probes at sub-picomolar concentrations by magnetic modulation. Optics Express. 16, 19253-19259 (2008).
- Danielli, A., Porat, N., Arie, A., Ehrlich, M. Rapid homogenous detection of the Ibaraki virus NS3 cDNA at pico-molar concentrations by magnetic modulation. Biosensors and Bioelectronics. 25, 858-863 (2009).
- . . Bio-Rad “Human angiogenesis assay panel”. , .
- . Instruction Manual. Bio-Plex Precision Pro Cytokine Assay. , .
