Stabilire un modello batterica cronica del mouse infettati con persistente<em> Salmonella</em> Colonizzazione typhimurium nell'intestino per 27 settimane.
Abstract
Il modello di infezione batterica del mouse è un sistema potente modello per lo studio di aree come infezioni, infiammazioni, immunologia, trasduzione del segnale, e tumorigenesi. Molti ricercatori hanno approfittato della colite indotta da<em> Salmonella</emTyphimurium> per gli studi sulla fase precoce di infiammazione e infezione. Tuttavia, solo pochi studi sono l'infezione cronica<em> In vivo</em>. I topi con<em> Salmonella</emEsistenza> persistente nel tratto gastrointestinale ci permettono di esplorare a lungo termine di interazione ospite-batterico, trasduzione del segnale, e tumorigenesi. Abbiamo stabilito un modello batterica cronica del mouse infettati con<em> Salmonella</em> Colonizzazione typhimurium nell'intestino del mouse di oltre 6 mesi. Per utilizzare questo sistema, è necessario che il ricercatore per imparare a preparare la coltura batterica e sonda gastrica degli animali. Noi dettaglio una metodologia per la preparazione coltura batterica e topi sonda gastrica. Mostriamo anche come rilevare la<em> Salmonella</emPersistenza> nel tratto gastrointestinale. Nel complesso, questo protocollo sarà di aiuto ricercatori che utilizzano il modello di infezione batterica del mouse per affrontare le questioni biologiche e microbiologiche di fondamentale importanza.
Protocol
Questo protocollo comprende tre parti: rilevamento di coltura batterica, gavage mouse e Salmonella. 1. Salmonella condizione di crescita. Preparare la Salmonella brodo Luria-Bertani (LB) piastra, incubare a 37 ° C durante la notte. Scegli un clone dalla piastra LB e mettere in 7 ml di LB in una provetta da 12 ml, e si agita a 37 ° C per circa 5 ore. Inoculare 50 LB ml con 0,05 ml di una cultura fase stazionaria e incubare a 37 ° C …
Discussion
Per utilizzare questo sistema, è necessario che il ricercatore per imparare a sonda gastrica degli animali. Noi dettaglio una metodologia per preparare la cultura batterica e sonda gastrica i topi. Mostriamo anche come monitorare la persistenza Salmonella nel tratto gastrointestinale (GI). Le fasi critiche in questo protocollo, tra cui:
Streptomicina-pretrattamento: Streptomicina-pretrattamento riusciva a liberarsi di qualche commensale della flora intestinale e fanno i topi suscettibili alla infe…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questo lavoro è stato sostenuto dal KO1 NIDDK DK075386 concessione e l'American Cancer Society RSG-09-075-01-MBC a giugno Dom