Establecer un modelo de crónica bacteriana ratones infectados con el persistente<em> Salmonella</em> Typhimurium colonización en el intestino durante 27 semanas.
Abstract
El modelo de ratón infectado de bacterias es un sistema poderoso modelo para el estudio de áreas tales como infección, inflamación, la inmunología, la transducción de señales y tumorigénesis. Muchos investigadores han tomado ventaja de la colitis inducida por<em> Salmonella</em> Typhimurium para los estudios en la fase temprana de la inflamación y la infección. Sin embargo, sólo unos pocos informes se encuentran en la infección crónica<em> In vivo</em>. Los ratones con<em> Salmonella</emExistencia> persistente en el tracto gastrointestinal nos permiten explorar el anfitrión-bacterial interacción a largo plazo, la transducción de señales y tumorigénesis. Hemos establecido un modelo de crónica bacteriana ratones infectados con el<em> Salmonella</em> Typhimurium colonización en el intestino del ratón más de 6 meses. Para utilizar este sistema, es necesario que el investigador para aprender a preparar el cultivo de bacterias y alimentación forzada de los animales. Se detalla una metodología para el cultivo de bacterias y preparar a los ratones por sonda nasogástrica. También muestra la forma de detectar la<em> Salmonella</em> Persistencia en el tracto gastrointestinal. En términos generales, este protocolo ayudará a los investigadores con el modelo de ratón infectado de bacterias para hacer frente a cuestiones biológicas y microbiológicas de fundamental importancia.
Protocol
Este protocolo incluye tres partes: la detección de un cultivo bacteriano, una sonda de ratón, y Salmonella. 1. Salmonella condiciones de crecimiento. Prepare la Salmonella caldo Luria-Bertani (LB) placa, se incuba a 37 ° C durante la noche. Elige un clon de la placa de LB y puesto en LB 7 ml en un tubo de 12 ml y agitar a 37 º C durante 5 horas. Inocular 50 ml de LB con 0,05 ml de un cultivo en fase estacionaria y se incuba a 37 …
Discussion
Para utilizar este sistema, es necesario que el investigador que aprender a alimentación forzada de los animales. Se detalla una metodología para preparar un cultivo bacteriano y alimentación forzada de los ratones. También muestra cómo controlar la persistencia de Salmonella en el tracto gastrointestinal (GI). Los pasos críticos de este protocolo, incluyendo:
Estreptomicina pretratamiento: estreptomicina pretratamiento podría deshacerse de algunos flora intestinal comensal y que los ratones…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabajo fue apoyado por el NIDDK KO1 DK075386 subvención y la Sociedad Americana del Cáncer RSG-09-075-01-MBC de junio dom