चूहे में ischemic मस्तिष्क क्षति के सर्जिकल शामिल स्ट्रोक अनुसंधान के लिए एक व्यापक रूप से प्रयोग किया जाता मॉडल है. यहाँ हम मध्य मस्तिष्क धमनी रोड़ा से फोकल मस्तिष्क ischemia के अधिष्ठापन प्रदर्शित करता है. Histological धुंधला हो जाना और चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग के द्वारा परिणामस्वरूप रोधगलितांश के विज़ुअलाइज़ेशन भी दिखाया गया है.
स्ट्रोक विकलांगता और एक दुनिया भर में वयस्कों में मृत्यु का तीसरा प्रमुख कारण का प्रमुख कारण है. मानव स्ट्रोक में, वहाँ एक उच्च चर नैदानिक राज्य मौजूद है, फोकल ischemia के पशु मॉडल के विकास में, तथापि, प्रयोगात्मक प्रेरित रोधगलितांश मात्रा के reproducibility को प्राप्त करने के लिए आवश्यक है. चूहे एक व्यापक रूप से इस्तेमाल किया स्ट्रोक के लिए पशु मॉडल इसकी अपेक्षाकृत कम पशुपालन की लागत के लिए और अपने कपाल संचलन के 2,3 मनुष्य की समानता के लिए कारण है. मनुष्यों में, मध्य मस्तिष्क धमनी (एमसीए) स्ट्रोक syndromes और एमसीए रोड़ा (MCAO) के कई तरीकों में सबसे अधिक प्रभावित है पशु मॉडल में इस नैदानिक सिंड्रोम नकल वर्णित किया गया है. क्योंकि recanalization सामान्यतः रोड़ा के एक अवधि के बाद मानव reperfusion, में एक तीव्र स्ट्रोक के बाद होता है इन मॉडलों के कई में शामिल किया गया. इस वीडियो में, हम अनायास उच्च रक्तचाप से ग्रस्त चूहा (SHR) में क्षणिक endovascular सीवन MCAO मॉडल प्रदर्शित करता है. एक टिप सिलिकॉन कोटिंग के साथ एक रेशा intraluminally 60 मिनट के लिए एमसीए मूल में रखा गया है, reperfusion के द्वारा पीछा किया. ध्यान दें कि इष्टतम रोड़ा अवधि Wistar या Sprague-Dawley जैसे अन्य चूहा उपभेदों में भिन्न हो सकते हैं. चूहे में स्ट्रोक के कई व्यवहार संकेतकों से पता चला रहे हैं. फोकल ischemia टी 2 भारित चुंबकीय अनुनाद छवियों का उपयोग कर पुष्टि की है और 24 घंटे MCAO बाद 2,3,5-triphenyltetrazolium क्लोराइड (टीटीसी) के साथ मस्तिष्क वर्गों धुंधला द्वारा.
मस्तिष्क ischemia के कृंतक मॉडल वैश्विक या फोकल और के रूप में पलटवाँ या अपरिवर्तनीय के रूप में वर्गीकृत किया जा सकता है है. हम एक पलटवाँ फोकल ischemia के मॉडल का उपयोग क्रम में reperfusion चोट है कि मानव स्ट्रोक रोगियों में निम्नलिखित recanalization हो सकता है की नकल है. जबकि इसी तरह कपाल परिसंचरण के मानव, व्यापक intracranial संपार्श्विक संचलन विलिस और असंगत रोधगलितांश 6 खंडों में leptomeningeal anastomoses परिणाम के सर्किल के कारण चूहे लाभ शेयरों. हम अनायास उच्च रक्तचाप से ग्रस्त (SHR) चूहे तनाव का उपयोग करें, क्योंकि रोधगलितांश आकार normotensive 7-10 चूहों की तुलना में फोकल मस्तिष्क ischemia को उजागर SHRs में अधिक है. SHRs में स्ट्रोक प्रेरण भी अधिक सुसंगत और अन्य सामान्य रूप से उपयोग किए जाने वाले 11 उपभेदों में कम से कम मृत्यु दर उत्पन्न हो सकता है. इसके अलावा, शारीरिक मापदंडों सर्जरी भर में निगरानी की जानी चाहिए, क्योंकि उतार – चढ़ाव रोधगलितांश मात्रा में परिवर्तनशीलता के लिए जोड़ सकते हैं, इन मानकों रक्तचाप, धमनी 2 हे और सीओ 2 स्तर, हाइपोथर्मिया, और hyperglycemia है, जो इस्कीमिक चोट 2,12 ख़राब कर सकते हैं शामिल . हाइपोथर्मिया विशेष चिंता का विषय है क्योंकि यह neuronal इस्कीमिक चोट की डिग्री को कम कर सकते हैं, और इसलिए एक thermoregulatory हीटिंग पैड पर सर्जरी के दौरान चूहे रखने के लिए आवश्यक है.
हम व्यावसायिक रोधगलितांश 13-15 आकार में स्थिरता बढ़ाने के प्रयास में इस प्रक्रिया में सिलिकॉन लेपित sutures तैयार रोजगार. परंपरागत रूप से, intraluminal sutures के एमसीए रोक देना करने के लिए इस्तेमाल किया लौ गोलाई 3-0 नायलॉन सीवन टिप या एक गर्म गोंद बंदूक का प्रयोग कर एक छोटे से गोंद 16 मनका के साथ सीवन टिप कोट द्वारा तैयार किया गया है. इन प्रक्रियाओं अलग टिप व्यास और इस तरह के साथ sutures के उत्पादन, एक सिवनी है कि एक भी चूहे के पोत व्यास मैच खोजने से पहले रोड़ा में कई प्रयास की आवश्यकता हो सकती है. MCAO इस वीडियो में वर्णित विधि पर अतिरिक्त रूपों और अधिक बाहर का रोड़ा, lenticulostriate शाखाओं बख्शते क्रम में करने के लिए एक शुद्ध cortical 17 रोधगलितांश, और एमसीए और ipsilateral आम मन्या धमनी के साथ – साथ रोड़ा संपार्श्विक रक्त प्रवाह 6,9 कम है शामिल हैं.
स्ट्रोक के कार्यात्मक प्रभाव व्यवहार परीक्षण, जिसमें विशिष्ट कार्यों में घाटा एक सरल स्कोरिंग पैमाने में परिलक्षित होते हैं की एक किस्म का उपयोग मूल्यांकन किया जा सकता है. उदाहरण के लिए, Bederson एट अल. 18 एक ऊंचा शरीर की स्थिति, एक पार्श्व पुश करने के लिए असममित प्रतिरोध, और खुले क्षेत्र चक्कर व्यवहार में forelimb बल की हद पर एक स्नायविक स्कोर ग्रेडिंग चूहों विकसित की है. फर्श करने के लिए दोनों forelimbs जब ऊंचा विस्तार और कोई अन्य घाटे प्रदर्शन चूहे वर्गीकृत किया गया "सामान्य (0)", contralateral forelimb बल के साथ चूहों जबकि केवल "मॉडरेट घाटे" (1) के साथ वर्गीकृत किया गया है. "गंभीर ग्रेड 2" चूहों एक पार्श्व बल contralateral पक्ष पर कम प्रतिरोध प्रदर्शित और "गंभीर ग्रेड 3" चूहों अतिरिक्त व्यवहार चक्कर में लगे हुए है. लोअर ग्रेड व्यवहार घाटे हमेशा अगले उच्च ग्रेड में मनाया गया (उदाहरण के लिए, ग्रेड 2 और 3 भी forelimb बल प्रदर्शित जानवरों) और इन अंकों रोधगलितांश 18 आकार में अंतर के भविष्य कहनेवाला थे. इस प्रकार, इस तरह के एक सरल स्कोरिंग प्रणाली एक तेजी से, स्ट्रोक से कार्यात्मक घाटे के अनुरूप अर्द्ध मात्रात्मक मूल्यांकन के लिए अनुमति देता है.
मस्तिष्क रोधगलन की हद तक के मापन सामान्य ऊतकों टीटीसी, cresyl वायलेट (Nissl दाग) या hematoxylin और eosin का उपयोग क्षति के लिए histological धुंधला द्वारा पूरा किया है. प्रसार भारित करने के लिए जल्दी समय बिंदुओं पर रोधगलितांश कल्पना एमआरआई रोड़ा के बाद, ऊतक कटाई के लिए आवश्यकता के बिना प्रत्येक व्यक्ति चूहे में एक रोधगलितांश मात्रा का निर्धारण करने के लिए अनुमति देते हैं. सहित चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग तकनीक, यह एक neuroprotective स्ट्रोक के बाद उपचार की प्रभावकारिता निर्धारित करने के उद्देश्य से अध्ययन में विशेष रूप से महत्वपूर्ण है, इमेजिंग MCAO बाद चूहे लेकिन पहले उपचार प्रशासन अन्वेषक आत्मविश्वास देता है कि सभी प्रयोगात्मक और नियंत्रण पशुओं शुरू करने के लिए इसी तरह के स्ट्रोक अनुभवी, परिवर्तनशीलता के confounding प्रभाव को कम करने स्ट्रोक प्रेरण में.
The authors have nothing to disclose.
हम बेथ Rauch और विस्कॉन्सिन विश्वविद्यालय चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग के लिए छोटे पशु इमेजिंग सुविधा धन्यवाद. मैडिसन विस्कॉन्सिन विश्वविद्यालय में न्यूरोलॉजिकल सर्जरी विभाग इस काम के लिए धन प्रदान किया.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
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4-0 Nylon suture | Doccol Corporation | 2-3 mm silicon coating length, 0.39 mm tip diameter | ||
Spontaneously hypertensive rats | Charles River Laboratories | 290-300 g, male | ||
Gaymar T/Pump thermoregulatory pump and pads | Gaymar Industries | |||
Vetroson V-10 bipolar electrosurgical unit | Summit Hill Laboratories | |||
Germinator 500 glass bead sterilizer | CellPoint Scientific | |||
Vasamedics Bpm2Laserflo blood perfusion monitor | TSI Inc. |