Flashは、E12.5マウス脳の凍結とCryosectioning

Summary

このビデオで明らかに瞬間冷凍のためのテクニックであり、マウスの胚脳組織をセクショニング。クリオスタットを使用するための有用なヒントが得られる組織のセクションは、クラックや他の歪みのないことを保証するために削減しながら使用できるトラブルシューティングの方法を含めて、与えられている。

Protocol

希望の時間のためのPBS中4％パラホルムアルデヒドで細胞を固定してください。 スクロース注入組織（cryoprotection） 2059チューブにPBS w / vの30％ショ糖液を作る。 PBSの組織が3倍リンス（ロッキング付き〜5分）。 30％ショ糖溶液中で組織を置きます。組織は、シンクしません。 ℃で一晩、または、それが沈没するまで4で組織を置きます。 情報と方向でcryom…

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Tissue-Tek Cryomold		Ted Pella, Inc.	27181
O.C.T.		Ted Pella, Inc	27050
Sucrose solution				30% sucrose solution in PBS w/v
paraformaldehyde				4% paraformaldehyde in PBS