分岐点間での樹の統合を調査するためにデジタルマイクロミラーデバイスと模様の光刺激
Summary
デジタルマイクロミラーデバイス（DMD）は、神経細胞の興奮性を制御するために、時間と空間の複雑なパターンを生成することができます。 DMDシステムの設計、建設、および操作に関連する問題について説明します。このようなシステムは、遠位樹状分岐点を越え非線形統合のデモンストレーションを有効にする。
Abstract
光は、神経細胞の興奮性を制御するための汎用性と正確な手段です。このようなチャネルロドプシンとケージ神経伝達物質などの光に敏感なエフェクターの最近の導入は、スペースと実験的神経科学のための有用な時間で、光のパターンを制御するためのより良い手段を開発する上での利益につながっている。共焦点、2光子顕微鏡で使用されている1つの従来の戦略は、回折限界のスポットに光を集中し、関心領域で順次にその単一のスポットをスキャンすることです。大きな領域は、短い時間枠の、イメージングのためのより光刺激により適用される問題の中で刺激する必要がある場合は、この手法には問題になります。代替戦略は、デジタルマイクロミラーデバイス（DMD）の助けを借りて、ターゲット上で完全な空間パターンを投影することです。 DMDのアプローチは、ハードウェアコンポーネントが比較的安価であるため魅力的ですし、商業的利益によってサポートされています。そのようなシステムは直立顕微鏡の利用できないため、我々はこのようなDMDシステムの構築と運用に重要な問題を議論します。我々は主に紫外光分解のためにシステムの構築を記述する場合でも、optogeneticの実験のためにはるかに簡単な可視光システムを構築するための修正も提供されます。 UV光分解システムは神経科学における基本的な問題を研究する実験をCARRYOUTするために使用された、どのように空間的に遠位樹状分岐点間で統合の入力を配布されます。結果は、統合が分岐点を越え非線形することができ、超線形の大部分がNMDA受容体によって媒介されることを示唆している。
Protocol
Discussion
DMDベースの光刺激のアプローチの利点は、ターゲットが比較的大きな面積を占める状況に最も明白である。興味の対象がそのような少数の樹状突起棘のような、非常に小さい場合、シーケンシャルスキャン共焦点、2光子のシステムは、より良いアプローチになる可能性があります。 DMDのアプローチの一つの重要な弱点は、使用可能な光のその非効率的な使用です。利用可能な光の大部分は?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
本作品は、VA研究サービスからC – MTにNIHとメリットのレビューからRO1でサポートされ、CWLの個々のNRSAした
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Modern upright fluorescent microscope | ||||
| CCD camera and image acquisition software | ||||
| Computer and data acquisition/interface system | ||||
| DLP Discovery Developer Kit | ||||
| ALP3 USB interface | ||||
| S2 + Optics w/LED | ||||
| Dual camera port unit | ||||
| 355nm frequency tripled NdVO4 laser (~1 W) | DPSS Laser Inc. | |||
| Laser shutter Model LS6 | Uniblitz | |||
| Multimode optical fiber and fiber stretcher Model# 915 | Canadian Instrument and Research, Ltd | 100 um core multimode fiber | ||
| Multimode Fiber launcher | Oz Optics | |||
| Signal generator | up to 50 kHz | |||
| Beam collimator | Olympus | DApo20UV340 | ||
| UV relay lens | Special Optics | #: 54-25-60-355 |
References
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