Rimozione del puparium di insetti: un metodo per l'indagine sulle pupe

Abstract

Fonte: Fukutomi, Y., et al. J. Vis. Exp. (2018). 

Questo articolo descrive una tecnica per rimuovere il puparium di un insetto mantenendo intatta la pupa interna e quindi adatta per ulteriori indagini. Il protocollo di esempio mostra la procedura con Drosophila guttifera; tuttavia, questa tecnica è applicabile ad altre specie di Drosophila.

Protocol

Questo protocollo è un estratto da Fukutomi et al., Methods for Staging Pupal Periods and Measurement of Wing Pigmentation of Drosophila guttifera, J. Vis. Exp. (2018). 1. Rimozione del puparium NOTA Le pupe di Drosophila sono coperte da una struttura chiamata puparium. Un insetto di Muscomorpha (mosche) non perde la sua cuticola larvale alla pupa; invece, indurisce la cuticola dopo …

Representative Results

Figura 1. Illustrazione della rimozione del puparium. (A) Posizionare un lato ventrale della pupa su un pezzo di nastro a doppia aspetto. Rimuovere la parte anteriore del puparium. (B) Rompere il puparium con le flesse dal lato ventrale. (C) Dopo aver rotto il puparium, eserti la pupa usando un pennello.

Materials

Drosophila guttifera	The Drosophila Species Stock Center at the U.C. San Diego	15130-1971.10	Drosophila guttifera,  a fruit fly species used in this article
NICETACK double sided tape	Nichiban	NW-15SF	Double sided tape,   for removing puparium
Dumont #5 forceps	Fine Science Tools	11252-20	Forceps,  for removing puparium
Van Gogh VISUAL Paint brush	Talens Japan	GWVR-#5/0	Paint brush,  for removing puparium
Stereomicroscope	Olympus	SZX16	Stereomicroscope,  for morphological observation
Digital camera	Olympus	DSE-330-A	Digital camera,  for imaging
Falcon standard tissue culture dish	Corning	353002	Plastic Petri dish (diameter 60 mm x height 15 mm)