Drosofilia Saggio di scavare e tunneling: un metodo per valutare l'ipossia tissutale nelle larve di mosca

Abstract

Fonte: Qiang, K.M., et al. J. Vis. Exp. (2018).

Questo video mostra un metodo per testare l’ipossia nelle larve di Drosophila valutando le loro capacità di scavare e tunneling. Utilizzando questa tecnica i ricercatori possono distinguere le larve che sperimentano la privazione di ossigeno da quelle con deficit di sviluppo. Il protocollo di esempio illustra l’impostazione per questo test.

Protocol

Questo protocollo è un estratto da Qiang et al., A Burrowing / Tunneling Assay for Detection of Hypoxia in Drosophila melanogaster Larvae, J. Vis. Exp. (2018). 1. Preparazione delle larve Due o più giorni prima di iniziare il saggio, impostare croci delle combinazioni sperimentali e di controllo desiderate (minimo 20 femmine e 10 maschi ciascuna) in piatti di deposizione delle uova come descritto da Wieschaus e Nusslein-Volhard ma utilizz…

Materials

REAGENTS
Dehydrated yeast
Frozen grape juice concentrate	Welch's		Available at most large supermarkets
Glacial acetic acid	Sigma-Aldrich	320099
Drosophila agar	Apex Bioresearch Products	66-103
Methyl-para-hydroxybenzoate	Apex Bioresearch Products	20-658
EQUIPMENT
50 ml polypropylene beakers
6.0 cm disposable Petri dishes	Falcon	08757100B
10 cm disposable plastic Petri dishes	E+K Scientific	EK-24104
Plastic microspatulas	Corning Incorporated	3012
Bent teasing needle	Nasco	S08848MH
Dissecting microscope			Any microscope with 10-30X magnification