Drosophila Ensayo de madriguera y tunelización: un método para evaluar la hipoxia tisular en larvas de mosca

Abstract

Fuente: Qiang, K.M., et al. A Burrowing/Tunneling Assay for Detection of Hypoxia in Drosophila melanogaster Larvae. J. Vis. (2018).

Este video muestra un método para probar la hipoxia en larvas de Drosophila mediante la evaluación de sus habilidades de madriguera y tunelización. Usando esta técnica los investigadores pueden distinguir las larvas que experimentan privación de oxígeno de aquellos con déficits de desarrollo. El protocolo de ejemplo muestra la configuración de este ensayo.

Protocol

Este protocolo es un extracto de Qiang et al., A Burrowing/Tunneling Assay for Detection of Hypoxia in Drosophila melanogaster Larvae, J. Vis. Exp. (2018). 1. Preparación de larvas Dos o más días antes de comenzar el ensayo, establecer cruces de las combinaciones experimentales y de control deseadas (mínimo 20 hembras y 10 machos cada una) en platos de lay de huevo como lo describen Wieschaus y Nusslein-Volhard pero utilizando vasos de …

Materials

REAGENTS
Dehydrated yeast
Frozen grape juice concentrate	Welch's		Available at most large supermarkets
Glacial acetic acid	Sigma-Aldrich	320099
Drosophila agar	Apex Bioresearch Products	66-103
Methyl-para-hydroxybenzoate	Apex Bioresearch Products	20-658
EQUIPMENT
50 ml polypropylene beakers
6.0 cm disposable Petri dishes	Falcon	08757100B
10 cm disposable plastic Petri dishes	E+K Scientific	EK-24104
Plastic microspatulas	Corning Incorporated	3012
Bent teasing needle	Nasco	S08848MH
Dissecting microscope			Any microscope with 10-30X magnification