Yumuşak Kas-iskelet Dokular Kök Hücre Yalıtımlı
Summary
Balona hücre bağlılık hızına göre kas-iskelet yumuşak dokulardan Yalıtımlı yetişkin kök hücreleri.
Abstract
Yetişkin kök hücreleri uzun rejeneratif tıp uygulama ile ilgili olarak ele alınmıştır. Yetişkin kök hücreleri, çok soyundan hücre farklılaşması ve kendi kendini yenileme yeteneği geçmesi etkileyici yetenekleri nedeniyle yaralı ve hastalıklı dokuların tedavisi için büyük bir heyecan yarattı. En önemlisi, bu niteliklere otolog hücre nakli tedavileri kullanmak için onları avantajlı hale getirmiştir. Geçerli protokol, kas-iskelet sistemi, örneğin, tendon ve kas, yumuşak doku 1 değiştirilmiş preplate tekniğini okuyucularına tanıtacak<sup> St</sup> Orta kollajen kaplı şişelerde yerleştirilen enzimatik olarak ayrışmış ve sonra. Orta ve kalan yüzen hücreler oluşur süpernatant, seri, yeni şişeler için günlük transfer edilir. Kök hücreler (seri transferleri veya preplates) genellikle 5-7 gün sürer şişeler uymak için en yavaş. Bu tekniği kullanarak, yetişkin kök hücreler bu dokuların mevcut oldukça non-invaziv prosedürler yoluyla kolayca hasat edilebilir.
Protocol
Discussion
Bu, bazı yetişkin dokularda çok kök hücreler içerdiğini kabul edilmiştir. Çalışmanın son birkaç yıl içinde, kök hücre, iskelet kas ve tendon gibi yumuşak kas-iskelet dokuları, tespit edilmiştir. Tendon ve iskelet kası yetişkin kök hücreleri izole etmek için başarılı bir laboratuvarda kullanılan olmuştur değiştirilmiş preplate tekniği olarak bilinen bu akım protokol detaylarının bir prosedür. Hücreleri yukarıda açıklanan değiştirilmiş preplate tekniği kullanarak çeşitli pop…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Yazarlar, güncel film ve slayt düzenleme hakkında yardım için Sayın Kyle Holden ve Sayın Jonathan Lucas için hücre izolasyonu, teknik yardım, Bayan Haiying Pan ve Bay Ian Bellayr büyük takdir. Dr: Geçtiğimiz yıllarda modifiye preplate tekniklerinin geliştirilmesi ile ilgili olan kişilerin aşağıdaki listeye çok teşekkürler. Burhan Gharaibeh, Baohong Cao, Deasy Bridget, Thomas R. Payne, Aiping Lu, Hairong Peng, Hideki Oshima, Bo Zeng, Xiaodong Mu, Kimimasa Tobita Ron Jankowski, Makato Ikezawa. James H. Cummins, Ryan Pruchnic, Joseph Feduska, Rebecca C. Schugar, Haiying Pan ve Jessica Tebbets teknik yardım için teşekkür ediyoruz. Yazar ayrıca Müsküler Distrofi Derneği (MDA), Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH), Savunma Bakanlığı (DOD), UPMC, Pittsburgh Çocuk Hastanesi, Anabilim Dalı Bu çalışma için mali destek kabul etmek gibi. Ortopedi ve Travmatoloji ve Pittsburgh Üniversitesi.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | Invitrogen | #11995-073 | ||
| FBS | Invitrogen | #10437-028 | ||
| Heat-inactivated horse serum | Invitrogen | #26050-088 | ||
| Chick embryo extract | Accurate Chemical | #CE650T-10 | ||
| 100U ml penicillin/streptomycin | Invitrogen | #15140-122 | ||
| Dulbecco’s PBS | Invitrogen | #14190-250 | ||
| Hank’s Buffered Salt Solution | Invitrogen | #24020-117 | ||
| Collagenase type XI 0.2%(wt/vol) | Sigma-Aldrich | #C7657 | ||
| Dispase2.4U ml | Invitrogen | #17105-041 | ||
| Trypsin-EDTA0.5%(wt/vol) (10x;5g liter trypsin (1:250) | Invitrogen | #15400-054 | ||
| Collagen for coating flask : Type I collagen derived from calf skin 0.1 g liter | Sigma-Aldrich | #C-9791 | ||
| DMSO | Sigma | #D-2650 |
References
- Gharaibeh, B. Isolation of a slowly adhering cell fraction containing stem cells from murine skeletal muscle by the preplate technique. Nat Protoc. 3, 1501-1509 (2008).
- Qu-Petersen, Z. Identification of a novel population of muscle stem cells in mice: potential for muscle regeneration. J Cell Biol. 157, 851-864 (2002).
- Li, Y. &. a. m. p. ;. a. m. p., Huard, J. Differentiation of muscle-derived cells into myofibroblasts in injured skeletal muscle. Am J Pathol. 161, 895-907 (2002).
- Watt, D. J., Lambert, K., Morgan, J. E., Partridge, T. A. &. a. m. p. ;. a. m. p., Sloper, J. C. Incorporation of donor muscle precursor cells into an area of muscle regeneration in the host mouse. J Neurol Sci. 57, 319-331 (1982).
- Lu, A. Isolation of myogenic progenitor populations from Pax7-deficient skeletal muscle based on adhesion characteristics. Gene Ther. 15, 1116-1125 (2008).
- Lee, J. Y. Clonal isolation of muscle-derived cells capable of enhancing muscle regeneration and bone healing. J Cell Biol. 150, 1085-1100 (2000).
- Cao, B. The role of receptors in the maturation-dependent adenoviral transduction of myofibers. Gene Ther. 8, 627-637 (2001).
- Cao, B. Muscle stem cells differentiate into haematopoietic lineages but retain myogenic potential. Nat Cell Biol. 5, 640-646 (2003).
- Huard, J. Regenerative medicine based on muscle stem cells. J Musculoskelet Neuronal Interact. 8, (2008).
- Gates, C. B., Karthikeyan, T., Fu, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Huard, J. Regenerative medicine for the musculoskeletal system based on muscle-derived stem cells. J Am Acad Orthop Surg. 16, 68-76 (2008).
