Drosophila-larven zijn lichtgevoelig en reageren op veranderingen in het omringende licht. Deze video beschrijft een test die hun vermogen om licht te vermijden test, de zogenaamde light spot assay. Het aanbevolen protocol laat zien hoe u de test instelt met een led met blauw licht en laat zien hoe u het gedrag van het dier kunt registreren als reactie op de ontmoeting met het licht.
Protocol
Deze protocoltekst is een fragment uit Sun et al., Light Spot-Based Assay for Analysis of Drosophila Larval Phototaxis, J. Vis. Exp. (2019). 1. Opzet van het beeldvormingssysteem Klem een webcamera met hoge resolutie vast met een ijzeren klem, op ongeveer 10 cm boven de lichtvlek op het bureaublad (Afbeelding 1). Pas de oriëntatie van de cameralens naar het bureaublad aan. Sluit de camera aan op een computer via een…
Representative Results
Figuur 1: Experimentele opstelling. (A) Schematische weergave van de opstelling voor de lichte spot-based larvale snelle fototaxis test. De blauwe lijnen vertegenwoordigen de paden van zichtbaar licht die worden gebruikt als visuele stimulatie, en de rode lijnen vertegenwoordigen de paden van infrarood licht. Pijlen geven de richting van het licht aan. Het 850 nm banddoorlaatfilter laat infrarood licht do…
Materials
850 nm ± 3 nm infrared-light-generating LED
Thorlabs, USA
PM100A
Compatible Sensors: Photodiode and Thermal
Optical Power Rangea: 100 pW to 200 W
Available Sensor Wavelength Rangea: 185 nm-25 μm Display Refresh Rate: 20 Hz
Bandwidth: DC-100 kHz
Photodiode Sensor Rangeb: 50 nA-5 mA
Thermopile Sensor Rangeb: 1 mV-1 V
LED Current Range: 0-2 A
LED Current Resolution: 1 mA
LED Current Accuracy: ±20 mA
LED Forward Voltage: 24 V
Modulation Frequency Range: 0-100 kHz Sine Wave
Modulation: Arbitrary
Collimated LED blue light
ELP, China
USBFHD01M
Max. Resolution: 1920×1080
F6.0 mm
Sensor: 1/2.7" CMOS OV2710
Compact power meter console
Ocean Optics, USA
USB2000+(RAD)
Dimensions: 89.1 mm x 63.3 mm x 34.4 mm
Weight: 190 g
Detector: Sony ILX511B (2048-element linear silicon CCD array)
Wavelength range: 200-850 nm
Integration time: 1 ms – 65 seconds (20 seconds typical)
Dynamic range: 8.5 x 10^7 (system); 1300:1 for a single acquisition
Signal-to-noise ratio: 250:1 (full signal)
Dark noise: 50 RMS counts
Grating: 2 (250 – 800 nm)
Slit: SLIT-50
Detector collection lens: L2
Order-sorting: OFLV-200-850
Optical resolution: ~2.0 nm FWHM
Stray light: <0.05% at 600 nm; <0.10% at 435 nm
Fiber optic connector: SMA 905 to 0.22 numerical aperture single-strand fiber
High-Power LED Driver
Minhongshi, China
MHS-48XY
Working voltage: DC12V
Central wavelength: 850nm
high-resolution web camera
Thorlabs, USA
MWWHL4
Color: Warm White
Correlated Color Temperature: 3000 K
Test Current for Typical LED Power: 1000 mA
Maximum Current (CW): 1000 mA
Bandwidth (FWHM): N/A
Electrical Power: 3000 mW
Viewing Angle (Full Angle): 120°
Emitter Size: 1 mm x 1 mm
Typical Lifetime: >50 000 h
Operating Temperature (Non-Condensing): 0 to 40 °C
Storage Temperature: -40 to 70 °C
Risk Groupa: RG1 – Low Risk Group
LED Warm White
Mega-9, China
BP850/22K
Ø25.4(+0~-0.1) mm
Bandwidth: 22±3nm
Peak transmittance:80%
Central wavelength: 850nm±3nm
Spectrometer
Noel Danjou
Amcap9.22
AMCap is a still and video capture application with advanced preview and recording features. It is a Desktop application designed for computers running Windows 7 SP1 or later. Most Video-for-Windowsand DirectShow-compatible devices are supported whether they are cheap webcams or advanced video capture cards.
Standard photodiode power sensor
Super Dragon, China
YGY-122000
Input: AC 100-240V~50/60Hz 0.8A
Output: DC 12V 2A
Thermal power sensor
Thorlabs, USA
M470L3-C1
Color: Blue
Nominal Wavelengtha: 470 nm
Bandwidth (FWHM): 25 nm
Maximum Current (CW): 1000 mA
Forward Voltage: 3.2 V
Electrical Power (Max): 3200 mW
Emitter Size: 1 mm x 1 mm
Typical Lifetime: 100 000 h
Operating Temperature (Non-Condensing): 0 to 40 °C
Storage Temperature: -40 to 70 °C
Risk Groupb: RG2 – Moderate Risk Group
Thermal power sensor
Thorlabs, USA
S401C
Wavelength range: 190 nm-20 μm
Optical power range:10 μW-1 W(3 Wb)
Input aperture size: Ø10 mm
Active detector area: 10 mm x 10 mm
Max optical power density: 500 W/cm2 (Avg.)
Linearity: ±0.5%