Drosophila Optogenética: Un método para manipular circuitos neuronales
Published: April 30, 2023
Abstract
Fuente: de Vries, S. E., Clandinin, T. Estimulación optogenética del comportamiento de escape en Drosophila melanogaster. J. Vis. (2013).
La optogenética permite el uso de la luz para manipular neuronas genéticamente diseñadas para expresar proteínas específicas sensibles a la luz cuya activación de la luz desencadena un cambio en el estado de la neurona. Aquí describimos un enfoque optogenético en Drosophila usando la opsina Channelrhodopsin2. El protocolo de ejemplo cuenta con un ensayo optogenético configurado para estudiar los circuitos neuronales detrás del comportamiento de escape de la mosca.
Protocol
Este protocolo es un extracto de de Vries y Clandinin, Estimulación Optogenética del Comportamiento de Escape en Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2013). 1. Generar moscas de channelrhodopsina Cruz UAS-ChR2 vuela con el conductor Gal4 de su elección, utilizamos G105-Gal4, que se expresa en las neuronas Foma-1 en el lóbulo óptico. Para eliminar la posibilidad de una respuesta visual a la estimulación de la luz azul, ambas líneas de vuelo están…
Representative Results
Figura 1: Configuración experimental que muestra la plataforma con el soporte vertical y los cuatro brazos de fijación de refrigerante que sostienen disipadores de calor con matrices LED adheridas a ellos. (A) La configuración bajo iluminación ambiental. (B) La configuración cuando se iluminan los LED. (C) Una vista de cerca de un LED Tri-Star en el disipador de calo…
Materials
| Reagent | |||
| All-trans Retinal | Advance Scientific Chemical Inc | R3041 | |
| Equipment | |||
| Heat Sink 9.2 C/W | Luxeonstar | LPD30-30B | 30 mm square X 30 mm high |
| Carclo 18° Tri-Lens | Luxeonstar | 10507 | |
| Blue Rebel LED on Tri-Star Base | Luxeonstar | MR-B0030-20T | 470 nm, 174 lm @ 700 mA. |
| 700 mA BuckPuck DC Driver | Luxeonstar | 3021-D-E-700 | |
| Wiring Harness for BuckPuck Driver | Luxeonstar | 3021-HE | |
| Pre-cut thermal adhesive tape | Luxeonstar | LXT-S-12 | 20 mm Hex Base |
| Snap-Loc Coolant Hose, ¼" ID | McMaster-Carr | 5307K49 | |
| Snap-Loc Coolant Hose Connector | McMaster-Carr | 5307K39 | ¼" NPT Male |
| Laboratory Grade Switching Mode Programmable DC Power Supply | BK Precision | 1698 | |
| Exilim camera | Casio | EX-FH20 |
Cite This Article
Drosophila Optogenetics: A Method to Manipulate Neuronal Circuits. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20149, doi: (2023).