成虫ハエからのミドグの解剖:消化管を分離する方法
Published: April 30, 2023
Abstract
出典: Tauc, H.M., ら. 老化時の幹細胞の挙動を研究するためにFACSによって成体 ショウジョウバエ ミダッツから腸幹細胞を分離. J. ヴィス・エクス (2014).
このビデオでは、単細胞解離およびFACSに適した成人 ショウジョウバエ 腸管の解剖と、腸幹細胞を単離するためにFACSの採取を強調する。
Protocol
このプロトコルは、タウス らからの抜粋であり、老化中の幹細胞の挙動を研究するためにFACSによって成体ショウジョウバエミダッツから腸幹細胞を分離する、J.Vis. Exp.(2014). 注:このプロトコルを使用して FAC のソートによって ISC を初めて分離する場合、FACS パラメータを最初に適切に設定するためには、次のコントロール…
Materials
| Forceps: Dumont, Inox Biologie #5 | Fine Science Tools | 11252-20 | |
| SefarNitex 03-150um/38 (35 µm nylon mesh) | Sefar | 3A03-0150-102-00 | |
| Falcon 5 ml Round Bottom Polystyrene Test Tube with Cell Strainer Snap Cap | Corning | 352235 | |
| Polymax 1040 | Heidolph | 543-42210-00 | |
| Albumin from bovine serum (BSA) | Sigma | A4503-50G | |
| 0.5% Trypsin-EDTA | Invitrogen | 15400-054 | Trypsin obtained from a different company most likely has a different activity and the duration of the trypsin digest has to be adjusted accordingly. |
| SYTOX Blue Dead Cell Stain for flow cytometry | Life Technologies | S34857 | |
| RNAlater Stabilization Solution | Life Technologies | AM7023 | Other solutions, e.g., Trizol can be used for subsequent RNA isolation |
| FACSAria II cell sorter | Becton Dickinson | Turn on one hour prior to sorting |
Cite This Article
Dissection of the Midgut from an Adult Fly: A Method for Isolating the Digestive Tract. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20150, doi: (2023).