DNA-ekstraksjon fra haleklipp: En metode som brukes i sebrafiskgenotyping
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Xing L., et al. Rask og effektiv sebrafiskgenotyping ved hjelp av PCR med høyoppløselig smelteanalyse. J. Vis. Utt. (2014).
Denne artikkelen beskriver DNA-ekstraksjon fra sebrafiskhaleklipp. Protokollen viser en rask og effektiv metode for å analysere sebrafiskgenotyper.
Protocol
1. DNA-forberedelse Klargjør DNA lysis buffer: 50 mM KCl, 10 mM Tris-HCl pH 8,3, 0,3% Tween 20, 0,3% NP40. Tilsett fersk Proteinase K i en endelig konsentrasjon på 1 mg/ml på bruksdagen. Vev samling: For voksen fisk fin klipp: Bedøv fisk: Legg fisken i 0,004% MS-222 (trikain) løsning. Vent til gillbevegelsen bremser. Sett fisk på en stabel med 5-10 Kimwipes og kutt et lite stykke halefinne, ca 2-3 mm, med et sterilt barberblad. Plasser fisken raskt i en me…
Materials
| 100 Reaction LightScanner Master Mix | BioFire | HRLS-ASY-0002 | www.biofiredx.com |
| Tricaine | |||
| Paraformaldehyde |
Cite This Article
DNA Extraction from Tail Clip: A Method Used in Zebrafish Genotyping. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20184, doi: (2023).