Preparación de muestras para metabolómica: un método para preparar muestras celulares para la elaboración de perfiles de metabolitos

Abstract

Fuente: Zhao, Y.C. et. al., Systems Biology of Metabolic Regulation by Estrogen Receptor Signaling in Breast Cancer. J. Vis. Exp. (2016).

Este video describe una técnica de preparación de muestras de células de cáncer de mama para el perfil de metabolitos. Las células del cáncer de mama se tratan con estradiol, que se une al receptor de estrógeno alfa y causa cambios en la composición del metabolito.

Protocol

1. Preparación de muestras de ensayo de metabolómica Cultivo y tratamiento celular Semillas 400.000 células MCF7 por placa de 10 cm en medio de crecimiento. Para cada tratamiento preparar tres muestras. Utilice dos placas en cada muestra para recibir suficientes celdas para la detección. El día 3, retire el medio y agregue 5 ml de medio fresco con o sin 10-8 M estradiol o E2 a las células. Tratar las células durante 24 horas (37 °C en ambiente humidificado 5% CO2). </…