במדידה Micro-vivo מחזור בשרירי השלד על ידי מיקרוסקופית תוך חיוני
Summary
שיטה צדדי חדש להסתכלות של microcirculation מוצג. זה נחשב מתאים תצפית ארוכת טווח, ועל בשילוב עם התערבויות ביולוגיות pharmacophysiological או המולקולרית.
Abstract
רקע: גורמי רגולציה ופיזיולוגיה מפורט ב microcirculation vivo נותרו לא הבהיר באופן מלא לאחר שיטות שונות של הדמיה המציא. בעוד פרמטרים רבים מקרוסקופית של זרימת הדם לשקף מהירות זרימה, שינויים מהירות זרימת הדם ואת כדוריות הדם האדומות (RBC) השטף אינו מחזיק קשר לינארי בין תצפיות מיקרוסקופיות. ישנם דיווחים של אי התאמה בין מהירות RBC RBC שטף, השטף RBC ונפח הפלזמה זרימה של הטרוגניות במרחב ובזמן של ויסות זרימת ברקמות הפריפריה תצפיות מיקרוסקופיות, בסיס מדעי הדרישה של מחקרים מפורטים יותר בתקנה microcirculatory באמצעות intravital במיקרוסקופ.
שיטות: שיטה שונה של ג'ף ליכטמן של בהתבוננות מיקרוסקופית vivo של השרירים sternomastoid העכבר. עכברים מורדמים, מאוורר, והזריקו עם PKH26L-fluorescently RBCs שכותרתו להסתכלות מיקרוסקופית.
התוצאה & מסקנות: RBCs שכותרתו fluorescently מזוהים ומכובדת היטב על ידי מיקרוסקופ שדה רחב. התכווצות שרירים שעורר להגדיל גירוי חשמלי המושרה RBC השטף. כימות הפרמטרים האחרים לרבות מהירות RBC וצפיפות נימי היו ריאלי. עכברים נסבל היטב את הניתוח, הזרקת RBCs מוכתם, תצפית מיקרוסקופי, גירוי חשמלי. שריר לא נזק או כלי דם נצפתה, טוען כי השיטה שלנו הוא יחסית פחות פולשני מתאים לטווח ארוך תצפיות.
Protocol
Discussion
Techinical נקודות חשובות הן כדלקמן: (1) תחזוקה של המצב הפיזיולוגי של החיה (, אוורור pH של הטמפרטורה פתרון perfusative, גוף), (2) נפח הזרקה של RBC מוכתם, ו (3) התנאים תצפית (עדשה אופטימלי , בחירת עוצמת הקרינה). יישומים עתידיים אפשריים הם כדלקמן: (א) בשילוב עם התערבויות ביולוגיות pharmacophysiological ו / או המולק?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
אנו מודים ג"ו ליכטמן על העצה שלו בהתבוננות vivo של השרירים.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| PKH26 dye | Sigma | 551/567 nm; Red fluorescent cell linker kit | ||
| C57BL/10 mice | Animal | Three to six month old males | ||
| pentobarbital | anesthetic, 50mg/kgBW, i.p. |
References
- Lichtman, J. W., Magrassi, L., Purves, D. Visualization of neuromuscular junctions over periods of several months in living mice. J Neurosci. 7, 1215-1222 (1987).
