Vivo में माइक्रो परिसंचरण कंकाल की मांसपेशी में अंतरराज्यीय महत्वपूर्ण माइक्रोस्कोपी द्वारा मापन
Summary
Microcirculation के अवलोकन के लिए एक नई बहुमुखी विधि प्रस्तुत किया है. यह लंबी अवधि के अवलोकन के लिए उपयुक्त माना जाता है, और pharmacophysiological या आणविक जैविक उपायों के साथ संयोजन के लिए.
Abstract
पृष्ठभूमि: नियामक कारकों और vivo microcirculation में विस्तृत फिजियोलॉजी बनी हुई है इमेजिंग आविष्कार था के कई अलग अलग तौर तरीकों के बाद पूरी तरह स्पष्ट नहीं है. है जहां रक्त के प्रवाह के कई macroscopic मापदंडों प्रवाह वेग, रक्त के प्रवाह वेग और लाल रक्त कोशिका (आरबीसी) में बदलाव को प्रतिबिंबित प्रवाह सूक्ष्म टिप्पणियों में रैखिक संबंध नहीं रखता है. आरबीसी वेग और आरबीसी प्रवाह, आरबीसी प्रवाह और प्लाज्मा प्रवाह की मात्रा के बीच है, और सूक्ष्म टिप्पणियों, microcirculatory विनियमन में अधिक विस्तृत अध्ययन की आवश्यकता के लिए वैज्ञानिक आधार का उपयोग परिधि के ऊतकों में में प्रवाह विनियमन के स्थानिक और लौकिक विविधता के विसंगति की खबरें हैं intravital माइक्रोस्कोपी.
विधि: हम माउस sternomastoid मांसपेशियों के vivo सूक्ष्म अवलोकन में जेफ है Lichtman की विधि को संशोधित. चूहे anesthetized हैं, हवादार, और सूक्ष्म अवलोकन के लिए PKH26L – fluorescently लेबल लाल रक्त कोशिकाओं के साथ इंजेक्शन.
परिणाम एवं निष्कर्ष: fluorescently लेबल लाल रक्त कोशिकाओं का पता चला और एक व्यापक क्षेत्र माइक्रोस्कोप के द्वारा अच्छी तरह से प्रतिष्ठित है. आरबीसी प्रवाह में बिजली की उत्तेजना से प्रेरित वृद्धि के द्वारा पैदा की मांसपेशी संकुचन. आरबीसी वेग और केशिका घनत्व सहित अन्य मानकों की मात्रा का ठहराव संभव थे. चूहे अच्छी तरह से सर्जरी, दाग लाल रक्त कोशिकाओं के इंजेक्शन, सूक्ष्म अवलोकन, और बिजली की उत्तेजना सहन किया. कोई मांसपेशियों या रक्त वाहिनियों को नुकसान मनाया था सुझाव है कि हमारे विधि अपेक्षाकृत कम आक्रामक और लंबी अवधि टिप्पणियों के लिए अनुकूल है.
Protocol
Discussion
महत्वपूर्ण techinical अंक निम्नानुसार हैं: (1) जानवर की शारीरिक स्थिति (वेंटिलेशन perfusative समाधान है, शरीर के तापमान के पीएच), (2) दाग आरबीसी के इंजेक्शन की मात्रा, और (3) शर्तों के अवलोकन के लिए रखरखाव (इष्टतम लेंस चयन, प्रतिदीप…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम मांसपेशियों के vivo अवलोकन में JW Lichtman में उनकी सलाह के लिए धन्यवाद.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| PKH26 dye | Sigma | 551/567 nm; Red fluorescent cell linker kit | ||
| C57BL/10 mice | Animal | Three to six month old males | ||
| pentobarbital | anesthetic, 50mg/kgBW, i.p. |
References
- Lichtman, J. W., Magrassi, L., Purves, D. Visualization of neuromuscular junctions over periods of several months in living mice. J Neurosci. 7, 1215-1222 (1987).
