İskelet kas-içi hayati Mikroskopi in vivo Mikro sirkülasyon Ölçümü
Summary
Mikrodolaşımında gözlem için yeni bir çok yönlü bir yöntem sunulmuştur. Bu uzun vadeli bir gözlem için uygun olduğu düşünülen ve pharmacophysiological veya moleküler biyolojik müdahaleler ile birlikte.
Abstract
AMAÇ: Düzenleyici faktörleri ve in vivo mikrosirkülasyon detaylı fizyolojisi kalmıştır tam görüntüleme icat eden pek çok farklı modaliteleri sonra açıkladı. Kan akımının birçok makroskopik parametreler akış hızı, kan akış hızı ve kırmızı kan hücre (RBC) değişiklikler yansıtırken akı mikroskobik gözlemler doğrusal bir ilişki tutmaz. RBC hız ve RBC akı, eritrosit akı ve plazma akışı hacmi arasında ve mikroskobik gözlemler, mikrosirkulasyonu yönetmelikte daha ayrıntılı çalışmalar gereksinimi için bilimsel bir temeli periferik dokularda akışını düzenleme mekansal ve zamansal heterojenliğin tutarsızlık raporları vardır intravital mikroskopi.
Yöntem: Biz in vivo fare sternomastoid kasların mikroskobik gözlem Jeff Lichtman yöntemi değiştirildi. Fareler anestezi, havalandırılmış ve mikroskobik gözlem PKH26L-floresan etiketli eritrositlerde enjekte.
SONUÇ & SONUÇLAR: floresan etiketli eritrositlerde algılanır ve çok geniş bir alan mikroskobu ile ayırt edilirler. RBC akı elektrik stimülasyonu bağlı artış ile uyarılmış kas kasılması. RBC hızı ve kapiller yoğunluğu da dahil olmak üzere diğer parametreleri Niceleme mümkün. Fare cerrahi, lekeli eritrosit enjeksiyonu, mikroskobik gözlem ve elektrik stimülasyonu iyi tolere edilir. Bizim yöntem, nispeten daha az invazif ve uzun vadeli gözlemler için uygundur olduğunu düşündüren herhangi bir kas veya kan damarı hasar gözlenmiştir.
Protocol
Discussion
Önemli Teknik Özellikleri noktalar şunlardır: (1) gözlem için hayvanın fizyolojik durumu (havalandırma perfusative çözüm, vücut ısısı, pH), (2) enjeksiyon hacmi lekeli RBC, ve (3) koşulları bakım (en uygun lens seçimi, floresan). Potansiyel gelecekteki uygulamalar şunlardır: (a) pharmacophysiological ve / veya moleküler biyolojik müdahaleler ile kombinasyonu, (b) arterio / arteriolo-skleroz ve neovaskülarizasyon uzun vadeli bir gözlem.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Biz kasların in vivo gözlem onun tavsiye JW Lichtman teşekkür ederim.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| PKH26 dye | Sigma | 551/567 nm; Red fluorescent cell linker kit | ||
| C57BL/10 mice | Animal | Three to six month old males | ||
| pentobarbital | anesthetic, 50mg/kgBW, i.p. |
References
- Lichtman, J. W., Magrassi, L., Purves, D. Visualization of neuromuscular junctions over periods of several months in living mice. J Neurosci. 7, 1215-1222 (1987).
