Deze video demonstreert het gebruik van een rail gemonteerd hoogfrequente ultrasone sonde naar echocardiografie te voeren op een verdoofde muis. De methoden beschrijven zowel conventionele twee-dimensionale en M-mode metingen van de hartfunctie in aanvulling op nieuwere, krachtige tools zoals kleur Doppler, rek-analyse, maar ook algemene en gerichte contrast beeldvorming.
Abstract
Knaagdier modellen van cardiale pathofysiologie vormen een waardevol hulpmiddel om onderzoek mechanisme van de ziekte en testen van nieuwe therapieën. Echocardiografie 1 biedt een krachtige, niet-invasieve tool om serieel te beoordelen cardiale morfometrie en functie in een levend dier te onderzoeken. 2 Echter, met deze techniek op muizen vormt unieke uitdagingen als gevolg van de geringe omvang en de snelle hartslag van deze dieren. 3 Tot voor kort, weinig ultrasound systemen die in staat zijn de kwaliteit echocardiografie op muizen, en die over het algemeen ontbrak het beeld resolutie en frame rate die nodig zijn om echt kwantitatieve metingen te verkrijgen . Onlangs vrijgegeven systemen zoals de VisualSonics Vevo2100 biedt nieuwe tools voor onderzoekers om zorgvuldig en niet-invasieve onderzoeken hartfunctie bij muizen. Dit systeem leidt tot hoge resolutie beelden en biedt analysemogelijkheden vergelijkbaar met die gebruikt bij menselijke patiënten. Hoewel de kleur Doppler is beschikbaar voor meer dan 30 jaar in de mens, is deze waardevolle technologie pas sinds kort mogelijk in knaagdieren echografie. 4,5 Color Doppler heeft een brede toepassingen voor echocardiografie, inclusief de mogelijkheid om stroom gerichtheid snel te beoordelen in schepen en door middel van kleppen, en om snel te identificeren klep regurgitatie. Stam analyse is een kritische tevoren dat wordt gebruikt om kwantitatief te meten regionale myocardiale functie. 6 Deze techniek heeft het potentieel om veranderingen in de pathologie, of de resolutie van de pathologie te detecteren, eerder dan conventionele technieken. In combinatie met de toevoeging van drie-dimensionale beeldreconstructie, volumetrische beoordeling van hele organen is mogelijk, inclusief visualisatie en evaluatie van de cardiale en vasculaire structuren. Muizen-compatibele contrast beeldvorming kan ook zorgen voor volumetrische metingen en weefselperfusie beoordeling.
Protocol
1. Voorbereiding voor imaging Begin met het beveiligen van een isofluraan verdoofde muis om een dier-handling platform in de rugligging. Plaats een neus over de neus van het dier en de mond tot 0,5-1% isofluraan te leveren aan de anesthesie te onderhouden. Zet de poten van de muis naar de elektroden met geleidende gel. Zorgen voor een passende ECG, lichaamstemperatuur bij 37 ° C en controleer ademhaling tarief voor fysiologische beoordeling tijdens beeldvorming. Van toepassing ontha…
Discussion
Serial hoge frequentie echocardiografie heeft ontpopt als een krachtig hulpmiddel voor niet-invasieve, hoge-resolutie beoordeling van de cardiale morfologie en functie, met name in muismodellen van hart-en vaatziekten. Handhaven van fysiologische lichaamstemperatuur en vergelijkbare hartslag tussen muizen door het aanpassen van de verdoving niveau van voor het verwerven van beelden, is cruciaal voor het succes van deze methode. Alle afbeeldingen moeten worden verkregen met dezelfde biomarkers (bijv. parasternale lange a…
Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. C. Murine Echocardiography and Ultrasound Imaging. J. Vis. Exp. (42), e2100, doi:10.3791/2100 (2010).