التصور الجهاز العصبي الجنينية في جبل لالجامع ذبابة الفاكهة الأجنة
Summary
نحن تصف الإجراء الذي قام بإعداد<em> ذبابة الفاكهة</em> أجنة لتصور للنظام العصبي الجنيني خلال مرحلة التطور الجنيني.
Abstract
الجنين هو نظام ذبابة الفاكهة نموذجا جذابا للتحقيق في الأساس الخلوية والجزيئية للتنمية الخلايا العصبية. نحن هنا وصف التصور الداخلي للنظام العصبي الجنيني ذبابة الفاكهة باستخدام الأجسام المضادة للبروتينات الخلايا العصبية. منذ تتميز جيدا الجنينية محيطي بأكمله العصبي المركزي والجهاز العصبي على مستوى الخلايا الفردية (Dambly – Chaudière وآخرون ، 1986 ؛. بودمر وآخرون ، 1987 ؛. بودمر وآخرون ، 1989) ، أي انحرافات يمكن لهذه النظم يمكن التعرف عليها بسهولة باستخدام الأجسام المضادة للبروتينات الخلايا العصبية المختلفة. يتم جمع الأجنة النامية في أوقات معينة لضمان أن الأجنة في المراحل التنموية المناسبة لالتصور. بعد جمعها ، وإزالة الطبقات الخارجية من الجنين ، والغشاء المغلف المشيماء المحي الذي يحيط الجنين ، قبل التثبيت. ثم يتم تحضين الأجنة مع الأجسام المضادة الخلايا العصبية وتصور باستخدام الأجسام المضادة الثانوية fluorescently المسمى. أجنة في مراحل 12-17 هي تصور للوصول إلى النظام العصبي الجنيني. في المرحلة ال 12 فرقة الجرثومية يبدأ الجهاز العصبي المركزي وتقصير مرحلة 15 أحرز نمط محدد للصوار. قبل 17 مرحلة يتم تطويره بالكامل العقود في الجهاز العصبي المركزي والجهاز العصبي المحيطي (كامبوس اورتيغا وآخرون 1985). بالتالي يمكن تغيير في نمط الجهاز العصبي المحيطي والجهاز العصبي المركزي يلاحظ بسهولة خلال هذه المراحل التنموية.
Protocol
Discussion
الجنين ذبابة الفاكهة هو نظام قوي للتحقيق التغييرات الخلوية والجزيئية أثناء تطوير الخلايا العصبية. في هذا البروتوكول قد أثبتنا كيفية تحضير الأجنة جبل كامل لالمناعية. وقد تكيفت نحن من هذا البروتوكول وصفها في بروتوكول كارول وسكوت ، 1985. ويمكن أيضا هذا البروتوكول ي?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
ويؤيد الأمين العام بأموال من جامعة ولاية نيويورك في بوفالو من مؤسسة جون وOishei ر.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 37% formaldehyde | Fisher | BP531-25 | ||
| CSP | Developmental Studies Hybridoma Bank | |||
| HRP-FITC | Jackson ImmunoResearch Laboratories | 323-095-021 | ||
| Alexa Fluor 568 Goat Anti-Mouse IgG | Invitrogen | A-11004 | ||
| Vectashield Mounting Medium | Vector Laboratories, Inc. | H-1000 |
References
- Bodmer, R., Barbel, S., Sheperd, S., Jack, J. W., Jan, L. Y., Jan, Y. N. Transformation of sensory organs by mutations of the cut locus of D. melanogaster. Cell. 51, 293-307 (1987).
- Bodmer, R., Carretto, R., Jan, Y. N. Neurogenesis of the peripheral nervous system in Drosophila embryos: DNA replication patterns and cell lineages. Neuron. 3, 21-32 (1989).
- Campos-Ortega, J. A., Hartenstein, V. . The Embryonic Development of Drosophila melanogaster. , (1985).
- Carroll, S. B., Scott, M. P. Localization of the fushi tarazu protein during Drosophila embryogenesis. Cell. 43, 47-57 (1985).
- Dambly-Chaudière, C., Ghysen, A., Jan, Y. N., Jan, L. Y. Muscle connections between imaginal discs in Drosophila. 발생학. 113, 288-294 (1986).
