Le maintien de Wolbachia dans la cellule sans moyen

Summary

Cette vidéo décrit un procédé de purification Wolbachia pipientis partir d'une ligne de cellules Anopheles gambiae et la culture de la endosymbiote dans la cellule sans moyen. Un test pour la viabilité de la bactérie est démontrée.

Abstract

Dans ce protocole vidéo, des procédures sont mises en évidence (1) d'épurer les symbiotes Wolbachia hors des cellules de moustique cultivé, (2) utiliser un test de fluorescence pour déterminer la viabilité de la bactérie Wolbachia purifiée et (3) maintenir les Wolbachia désormais extracellulaire dans la cellule du milieu sans . Purifié par Wolbachia rester en vie dans la phase extracellulaire mais ne répliquent pas jusqu'au re-inoculée dans les cellules eucaryotes. Wolbachia extracellulaires purifiés de cette manière restera viable pour au moins une semaine à température ambiante, et peut-être plus. Purifié par Wolbachia sont adaptés à la micro-injection, extraction d'ADN et d'autres applications.