Aerobik Mantarlar Kontrollü Bitki Doku Ayrışma Agar-Blok Microcosms
Summary
Bu video, aerobik mantar lignocellulosic bitki dokularında bozulma çalışma kontrollü bir ortamda bir yaklaşım göstermektedir. Besin kaynakları ve nem kontrolü için agar-blok microcosms yeteneği önemli bir avantaj, ancak bu yaklaşım genellikle karışık başarı verimleri. Biz, tekrarlanabilir, düşük değişkenlik verim kritik tuzaklar adresi.
Abstract
Ahşap koruyucu testi (agar-blok toprak blok) lignocellulosic bitki dokularında mantar biyodegradasyon eğitim için iki temel yöntem geliştirilmiştir. Toprak blok microcosms yüksek çürüme oranları, daha az nem sorunlarının, düşük çalışmalar arasında değişkenlik ve koruyucu toksisite eşikleri yüksek verim çok iyi kabul edilir. Toprak-blok test böylece daha fazla kullanılan bir tekniktir ve Amerikan Test ve Malzeme Derneği (ASTM) (yöntem D 1413-1407) tarafından standardize edilmiştir. Toprak-blok tasarımı, ancak yerel değişken toprak kaynakları kullanarak, sakıncaları ve çürüyen dokulara besin dış (eksojen) kontrolü sınırlandırılmasında. Bu sakıncaları, diğer giderek daha popüler araştırma amaçları için bu yöntemi uygulayarak bir sorun olarak ortaya çıkmıştır. Bu modern amaçları hifal ağları birlikte oksidatif mekanizmaları ve izleme transloke unsurları değerlendirirken, co-metabolize toksik biyoremidasyonu test biyoenerji araştırma, aşağılayıcı lignocellulosics içerir. Toprak-bloklar bu uygulamaların yeterince kontrol ödünç yoktur. Rafine agar-blok bir yaklaşım gereklidir.
Burada, ahşap aşağılayıcı mantar Serpula lacrymans düşük kalsiyum agar ile derin Petri kapları kullanarak, agar-blok microcosms ahşap düşmeye kahverengi çürüklük kullanın. Bir zaman serisi, çürüme eksojen alçı taşı rolünü test programı ve beklenen değişkenlik göstermek için. Tek bir yönetim kurulu rip (uzunlamasına kesilmiş) engeller, klimalı, tartılır, otoklava ve plastik hasır tepesinde aseptik tanıttı. Eksojen alçı arayüzler eklenmiş Mantar aşılar, her blok yüzüne. Hasat son yıkıcı hasata kadar aseptik. Bu microcosms agar veya Petri kabı duvarlar ile blok temasından kaçınmak için tasarlanmıştır. Yoğunlaşma plaka dökülen sırasında ve inkübasyon sırasında en aza indirilmiştir. Son olarak, inokulum / alçı / tahta boşluk izin vermeden, ancak temas en aza indirilmiştir. Bu agar-blok tasarımı daha az teknik yönlerini de başarısızlık ve en önemli çalışmalar arasında değişkenlik kaynağı en yaygın nedenlerinden. Video yayında bu durumda bu nedenle yararlı ve düşük değişkenliği, yüksek kaliteli sonuçlar göstermektedir.
Protocol
Discussion
Agar-blok set-up (Şekil 1) kullanarak Serpula lacrymans (Şekil 3 kontrol kahverengi-çürümüş çam blokları% 60 daha fazla kilo kaybına yol açan, alçı yüzeyler ve ahşap bloklar (Şekil 2) içine doğrudan temas halinde büyüdü .) Bu kolay çürüme>% 50 ASTM standart hedefi tatmin ve az çürüme ortalama varyasyon katsayısı (C V) 0,055 16. hafta. Bu veri Schilling 7 yayınlanmıştır. Yine, diğer mantar agar-blok toprak blok daha uzun kuluçka gerekecektir. Başvuru i…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Petri dishes | Nunc | 4014 | 25 x 150 mm | |
| Agar, Type A | Sigma | A4550 | ||
| Ammonium nitrate, NH4NO3 | Millinckrodt | 3436-12 | ||
| Potassium phosphate, KH2PO4 | J.T. Baker | 3246-01 | ||
| Magnesium sulfate 7-hydrate, MgSO4•7H2O | Sigma | 230391 | ||
| D-(+)-Glucose | Sigma | G8270 | Dextrose | |
| Boric acid, H3BO4 | Mallinckrodt | 2549-04 | ||
| Zinc sulfate 7-hydrate, ZnSO4•7H2O | Mallinckrodt | 8880-12 | ||
| Manganous chloride 4-hydrate, MnCl2•4H2O | J.T. Baker | 2540-04 | ||
| Copper(II) sulfate 5-hydrate, CuSO4•5H2O | Sigma | 209198 | ||
| Ammonium heptamolybdate 4-hydrate, (NH4)6Mo7O24•4H2O | Sigma-Aldrich | 431346 | ||
| Calcium chloride dihydrate, CaCl2•2H2O | Mallinckrodt | 4160-12 | ||
| Sodium chloride, NaCl | Mallinckrodt | 7581-12 | ||
| Ferrous sulfate 7-hydrate, FeSO4•7H2O | Mallinckrodt | 5056-12 | ||
| Pipet-aid | Drummond | 4-000-110 | Cordless EtOH the surface |
|
| 10 ml sterile polystyrene pipette | BD Biosciences | 357551 | ||
| Gutter Guard | Thermwell Products Co. | VX620 | Pre-scrubbed with soap Hardware store |
|
| Calcium sulfate hemihydrate, CaSO4•0.5H2O | Acros Organics | 385355000 | ||
| #4 cork borer | Boekel | 1601 | ||
| Parafilm “M” | Pechiney | PM-996 |
References
- ASTM D1413-07. Standard test method for testing wood preservatives by laboratory soil-block cultures. . Annual Book of ASTM Standards. , 185-192 (2007).
- Bravery, A. F. . A miniaturized wood block for the rapid evaluation of wood preservative fungicides. , (1978).
- Low, G. A., Young, M. E., Martin, P., Palfreyman, J. W. Assessing the relationship between the dry rot fungus Serpula lacrymans and selected forms of masonry. Int. Biodeterior. Biodegrad. 46, 141-150 (2000).
- Nicolas, D. Volume I (One/1) – Degradation and Protection of Wood (Syracuse Wood Science Series #5). Wood Deterioration and Its Prevention by Preservative Treatments. , (1973).
- Schilling, J. S. Effects of calcium-based materials and iron impurities on wood degradation by the brown rot fungus Serpula lacrymans. Holzforschung. 64, 93-99 (2010).
