निर्माण, और गैर इनवेसिव हिल जांच करने के लिए विभिन्न जैविक प्रणालियों में bioelectric वर्तमान को मापने के अंशांकन उपयोग वर्णित है.
Abstract
इलेक्ट्रिक क्षेत्रों, आयनों के सक्रिय परिवहन द्वारा उत्पन्न, कई जैविक प्रणालियों में मौजूद हैं और अक्सर ऊतकों और अंगों में महत्वपूर्ण कार्यों की सेवा. उदाहरण के लिए, वे घाव भरने के दौरान सेल प्रवास के निर्देशन में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं. यहाँ हम निर्माण और बाह्य बिजली की धाराओं को मापने के लिए ultrasensitive हिल जांच के उपयोग का वर्णन. जांच एक अछूता, एक छोटे से प्लैटिनम काले (30-35 सुक्ष्ममापी) टिप है, जो शारीरिक खारा में μA / 2 सेमी रेंज में ईओण धाराओं का पता लगा सकते हैं के साथ धातु के तार तेज है. जांच के बारे में 200 हर्ट्ज पर एक piezoelectric शराबी द्वारा स्फूर्त है. एक ईओण का वर्तमान की उपस्थिति में, जांच अपने आंदोलन के चरम सीमाओं के बीच एक वोल्टेज अंतर का पता लगाता है. बाहरी शोर बाहर कंपन की जांच की आवृत्ति पर बंद करके प्रवर्धक फिल्टर एक ताला. डेटा को कंप्यूटर पर दर्ज किया गया है. जांच और उचित खारा में प्रयोगों के शुरू और अंत में calibrated है, जो बिल्कुल μA / 2 सेमी 1.5 के एक मौजूदा लागू होता है एक कक्ष का उपयोग कर. हम वर्णन कैसे जांच करने के लिए, सिस्टम सेट और जांचना. हम भी कॉर्निया माप की तकनीक का प्रदर्शन, और विभिन्न नमूनों (कॉर्निया, मस्तिष्क, त्वचा) से कुछ प्रतिनिधि के परिणाम दिखाने के.
Protocol
1. जांच निर्माण खाली जांच विश्व प्रेसिजन उपकरण से खरीद रहे हैं (elgiloy / स्टेनलेस parylene लेपित microelectrodes) (नीचे 'विशिष्ट अभिकर्मकों और उपकरणों की टेबल' देख). जांच टिप के पीछे 25-30 मिमी काट रहा है और के बारे म?…
Discussion
हम एक कम लागत, बुनियादी, लेकिन अत्यधिक संवेदनशील हिल जैविक प्रणालियों की एक किस्म में गैर invasively विद्युत प्रवाह को मापने के लिए जांच प्रणाली का वर्णन.
संभावित संशोधन
यदि / प्लैटिनम iridium इलेक्…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम प्रोफेसर रिचर्ड Borgens, पक्षाघात अनुसंधान, पर्ड्यू विश्वविद्यालय, के लिए हिल जांच प्रणाली कोडांतरण में मदद के लिए केंद्र के लिए आभारी हैं. इस अध्ययन MZ और बीआर Nei अनुदान NIH 1R01EY019101 द्वारा समर्थित था, और कैलिफोर्निया इंस्टीट्यूट ऑफ पुनर्योजी RB1 01,417 चिकित्सा, NSF MCB 0,951,199 से अनुदान द्वारा और रोकें दृष्टिहीनता, UC डेविस नेत्र विज्ञान अनुसंधान से एक अप्रतिबंधित अनुदान द्वारा भाग में.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Eligoy-Stainless Electrode
World Precision Instruments
SSM33A70
76 mm, 7 MΩ, 1-2μm tip
Gold R30 connector
www.vectorelect.com
R30
Re-usable
Silver-loaded epoxy
3M
SL65
Mix 1-part Resin with 1-part Hardener
Dissecting microscope
Olympus
SZ40
Magnification x6 to x40
Potassium dicyanoaurate (KAu(CN)2)
Sigma-Aldrich
379867
CAUTION: Toxic
Chloroplatinic acid hydrate (H2PtCl6 x 6H2O)
Sigma-Aldrich
520896
CAUTION: Toxic
Lead(II) acetate trihydrate (Pb(CH3CO2)2 x 3H2O)
Sigma-Aldrich
185191
CAUTION: Toxic
Nano-Amp power source
Made in-house
–
Powered by six 1.5 V (AAA) batteries
3-dimensional micro-positioner
Line Tool Co.
Model H
Lock-in amplifier
Stanford Research Systems
SR530
Digital I/O interface
National instruments
PCI-6220
Shielded Connector Block with BNC connections
National instruments
BNC-2110
Strathclyde Electrophysiology Software
University of Strathclyde Institute of Pharmacy and Biomedical Sciences, UK