Ex Vivo Cultura de tejido del paciente y examen de la entrega de genes
Summary
En este artículo se describe la cultura de los cortes de tejido de pacientes para estudios de administración de genes y el posterior análisis de la expresión génica mediante imágenes de bioluminiscencia IVIS.
Abstract
Este vídeo describe el uso de tejido de un paciente como un modelo ex vivo para el estudio de la administración de genes. Tejido fresco obtenido del paciente en el momento de la cirugía se rebana y se mantienen en cultivo. El sistema vivo ex modelo permite la entrega física de los genes en el tejido del paciente intacto y la expresión de genes es analizado por imágenes de bioluminiscencia utilizando el sistema de detección de IVIS. El sistema de detección bioluminiscentes demuestra la cuantificación rápida y precisa de la expresión génica dentro de sectores individuales sin necesidad de sacrificar tejido. Este tejido rebanada sistema de cultivo puede ser utilizado en una variedad de tipos de tejidos incluyendo los tejidos normales y malignos, y nos permite estudiar los efectos de la naturaleza heterogénea del tejido intacto y el alto grado de variabilidad entre los pacientes individuales. Este modelo de sistema se podría utilizar en ciertas situaciones, como una alternativa a los modelos animales y como un modo complementario preclínicas antes de entrar en ensayos clínicos.
Protocol
Discussion
Se describe un paciente ex vivo de tejidos método de cultivo y sistema de detección de bioluminiscencia para la evaluación de la entrega de genes dentro de no fija el tejido humano. El método ofrece una forma simple y reproducible de los cortes de tejido de cultivo. Tiene un potencial significativo, ya que permite el estudio de la administración de genes en el tejido humano intacto, el análisis de la entrega de genes en una variedad de tejidos humanos, incluidos los tejidos malignos y pueden proporcionar …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabajo fue financiado a través del sur de Cork Hospital Victoria de fondos del Hospital Universitario de mama, la Sociedad del Cáncer de Irlanda (CRI07TAN) y el Centro de Investigación del Cáncer Cork. Replicación incompetente adenovirus recombinante partículas de 5 bajo el control transcripcional del promotor de CMV fue una especie de regalo del profesor Andrew Baker, de la Universidad de Glasgow.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | ||
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | ||
| Firefly Luciferin | Biosynth, Switzerland | |||
| Dermabond | Johnson & Johnson | |||
| Vibrotome | Leica microsystems | VT 1000 A |
References
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