हम एक alternant चूहों में मॉडल उतारने hindlimb विकसित की है. हमारे hindlimb उतारने पारंपरिक मोरे Holton पूंछ कर्षण तकनीक पर पूंछ अंगूठी विधि का प्राथमिक लाभ यह है कि जानवर पर तनाव कम से कम एक सरल सरल प्रक्रिया है.
मोरे Holton hindlimb उतराई विधि (एच यू) एक व्यापक रूप से स्वीकार किए जाते नेशनल एयरोनॉटिक्स एंड स्पेस एडमिनिस्ट्रेशन (नासा) 4-6 कृन्तकों में अप्रचार शोष अध्ययन के लिए भूमि आधारित मॉडल है . हमारे अध्ययन से चूहों में सोने के मानक मोरे Holton HU तकनीक पूंछ कर्षण के लिए एक alternant विधि का मूल्यांकन किया. पचास चार मादा चूहों (08/04 मो.) 14 दिनों के लिए एच यू (n = 34) या 28 दिन (n = 20) थे. एच यू से वसूली एच यू (n = 22) निम्नलिखित 3 दिन सामान्य पिंजरे ambulation के बाद मूल्यांकन किया गया था. आयु मिलान चूहों (n = 76) वजन रखनेवाला नियंत्रण के रूप में सेवा की.
एच यू के लिए पहले 2-0 बाँझ शल्य कि 5 वें, 6 वें या 7 वें अंतर कशेरुका डिस्क स्थान के माध्यम से पारित किया गया था और जिसमें से चूहों को निलंबित कर दिया गया एक अंगूठी आकार में इस्पात तार के साथ एक पूंछ की अंगूठी गठन किया गया था. पूंछ अंगूठी के लिए कशेरुका स्थान के लिए उचित शौच के साथ हस्तक्षेप किए बिना पशु शरीर के वजन के संतुलन के लिए चुना गया था.
हम पहले और बाद में एच यू, soleus शोष की डिग्री, और अधिवृक्क जन निम्नलिखित एच यू में शरीर के वजन का आकलन करके इस उपन्यास HU तकनीक की सफलता निर्धारित की. चूहों की शारीरिक वजन एच यू (24.3 ± 2.9g) से पहले काफी एच यू के 14D (22.7 ± 1.9g), एच यू के 28d (21.3 2.1g +) के बाद या 3 दिन वसूली के बाद तुरंत गिरावट नहीं (24.0 ± 1.8g) . Soleus मांसपेशियों काफी क्रमशः 14 दिन और 28 दिन के लिए एच यू (0.001 <पी) के बाद अस्वीकृत (-39.1%, और -46.6%). बाद वसूली soleus मास की 3 दिन में काफी नियंत्रण मूल्यों की 74% वृद्धि हुई है. HU चूहों के अधिवृक्क वजन नियंत्रण चूहों की तुलना में अलग नहीं थे.
हमारे उपन्यास एच यू विधि की सफलता हू, उम्मीद साहित्य मूल्यों के लिए इसी 2, 7, 8 के बाद पशु शरीर के वजन, तुलनीय अधिवृक्क ग्रंथि वजन, और soleus शोष के रखरखाव द्वारा evidenced है . इस एच यू विधि का प्राथमिक लाभ में शामिल हैं:) 1 निलंबन के दौरान पूंछ परीक्षा के आराम, 2) cyanotic, सूजन, और / या परिगलित अक्सर पूंछ टेप और एच यू के साथ मनाया पूंछ की संभावना कम;) 3 चूहों की कोई संभावना नहीं कर्षण चबाने टेप और निलंबन तंत्र के बाहर आ रहा है, और 4) तेजी से वसूली और एच यू के तुरंत बाद सामान्य पिंजरे गतिविधि.
हम hindlimb उतारने चूहों का एक वैकल्पिक तरीका है, जो हम अत्यधिक सफल होना निर्धारित मूल्यांकन किया है. विधि पूंछ अंगूठी के रूप में यहाँ वर्णित लंबी अवधि hindlimb निलंबन के लिए इस्तेमाल किया गया था, और वसूली के बाद एच यू अध्ययन. इन शर्तों में से प्रत्येक के तहत, वहाँ के लिए अनुकूल स्थिर भोजन का सेवन शरीर के वजन, और चूहों के अधिवृक्क वजन द्वारा evidenced के रूप में विफलता के कोई सबूत नहीं था. यह पूंछ अंगूठी एच यू तकनीक प्रदर्शन करने के लिए आसान है और आसानी से बहुत कम शल्य चिकित्सा के अभ्यास के साथ शामिल किया जा सकता है.
वहाँ पारंपरिक 5 मोरे Holton, 6 विधि तुलना पूंछ अंगूठी विधि के कई फायदे हैं. सबसे पहले, कि पूंछ पर अंगूठी आरोपण साइट त्वचा हमेशा दिखाई दे रहे हैं, इसलिए यदि समस्याएं उत्पन्न होती है यह तुरंत स्पष्ट है, निलंबन अवधि के अंत में न सिर्फ. दूसरा, पशुओं के निलंबन तंत्र के बाहर किसी भी समय एच यू के दौरान मिलता है, कि एक माउस या डेटा सेट में नहीं रखने के लिए दृढ़ संकल्प के एक बनाने की जरूरत है obviating में सक्षम नहीं हैं. इसके अलावा, चूहों की अंगूठी तंत्र परेशान नहीं है और, जब वे वसूली के लिए एच यू से जारी कर रहे हैं, वे अपनी पूंछ के साथ छेड़छाड़ नहीं है, एक सहज वसूली एच यू निम्नलिखित चरण के लिए अनुमति देता है. अंत में, पूंछ अंगूठी विधि के साथ hindlimb उतार चूहों अपने शरीर के वजन को बनाए रखने चूहों hindlimb मोरे Holton तकनीक पूंछ – कर्षण द्वारा उतार से बेहतर. हमारे हाथ में एच यू के 14 दिनों के बाद हम शरीर मास में (-6.8%) छोटी लेकिन गैर महत्वपूर्ण नुकसान मनाया. जबकि Ingalls एट अल. एच यू के 14 दिनों के बाद मोरे – Holton विधि 3 के द्वारा चूहों में शरीर के वजन में एक महत्वपूर्ण -12% कमी मनाया . हालांकि Ingalls अधिवृक्क वजन रिपोर्ट नहीं था, यह प्रतीत होता है कि हमारे पूंछ अंगूठी विधि (हमारे HU चूहों में अधिवृक्क वजन नियंत्रण से अलग नहीं कर रहे हैं) माउस और hindlimb उतारने की अवधि के दौरान शरीर के वजन के बेहतर रखरखाव पर कम तनाव प्रदान है.
संक्षेप में, hindlimb उतराई के एक पूंछ अंगूठी विधि विकसित किया गया था और 14 और 28 दिनों के लिए एच यू चूहों पर परीक्षण किया, और चूहों पर एच यू के बाद 3 दिन के लिए पिंजरे वसूली के लिए लौटे. अधिवृक्क वजन, शरीर द्रव्यमान और भोजन का सेवन के आधार पर, चूहों को अच्छी तरह से पूंछ अंगूठी तंत्र के लिए अनुकूलित है दिखाई देते हैं. पूंछ अंगूठी विधि उतारने hindlimb एक उपयोगी, पारंपरिक मोरे Holton hindlimb उतराई तकनीक के लिए सरल विकल्प है.
The authors have nothing to disclose.
लेखकों को अपने पशुओं के लिए तकनीकी सहायता और देखभाल के लिए एक उत्कृष्ट हमारी प्रयोगशाला में स्नातक शोध छात्र, एंड्रयू जम्मू डन, शुक्रिया अदा करना चाहूँगा. स्वास्थ्य अनुदान HD058834 और मिसौरी जीवन विज्ञान फैलोशिप विश्वविद्यालय के राष्ट्रीय संस्थान इस काम वित्त पोषित.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Wire cutters/pliers | Ace Hardware | 84-056 | ||
Gauze | Fisher Scientific | 22-037-901 | ||
Heating pad | Sunbeam | Z-1228-001 | ||
Silver nitrate applicators | ARZOL | 0001-2 | ||
Isoflurane,USP | Novaplus | NDC 0409-3292-49 | ||
Chlorhexidine Gluconate 4% | Purdue Products L.P | NDC 67618-200-01 | ||
Sterile 2-0 surgical steel suture | Ethicon | SS-28 | ||
25 X 5/8 A gauge needle | Terumo | NN 2516R | ||
Hemostat/ needle holder | Fine Science Tools | 12500-12 | ||
Size 10-24 X 4 machine screws | Hillman The Fastener Center | 90272 | ||
Nylon lock nut size 10 X 24 | Hillman The Fastener Center | 180141 | ||
Wing nut size 10 X 24 | Hillman The Fastener Center | 180243 | ||
Fender Washer size ¼ X 1 | Hillman The Fastener Center | 290012 | ||
Fishing swivel with snap hook size #6, 1-11/16” | Bass Pro Shop | 38-481-554-01 | ||
Metal sewing machine bobbin. | Singer | 45785 | ||
Paper clip | Office Depot | 221720 | ||
2” black paper binder clamps. | Office Depot | 308957 | ||
Scotch Multi-Use Duct Tape | Office Depot | 790710 | ||
1-3/8” Plated slotted steel bar | Home Depot | 548932 | Extends slightly beyond the full length of the cage | |
50cm X 40cm X 20cm cage (rat cage | Alternative Design Manufacturing | RC88D-PC | ||
Water Bottle | Alternative Design Manufacturing | WB16FS | ||
Stainless Steel wire | Small Parts, Inc | SWX-4029 | U-shaped wire to support water bottle |