滴流和旋转盘反应器使用金黄色葡萄球菌生物膜分析
Summary
详细介绍了利用开放系统流生物膜与滴流反应器和旋转磁盘反应堆的协议。
Abstract
被认为是自然界中最微生物在生物膜表面相关的社区存在。细菌生物膜 1矩阵内的包裹和连接表面生物膜的形成和发展，通常是在实验室使用批处理系统，如微孔板或流量的研究系统，如流细胞。这些方法，筛选突变体和化学库（微孔板）可视化（流动池）4 3或生长生物膜。在这里，我们提出两种其他类型的流量系统生物膜生长在金黄色葡萄球菌的详细协议：滴流生物膜反应器和生物膜反应器的旋转盘。
滴流生物膜反应器是专为低剪切条件下生长的生物膜的研究，5滴流式反应器由四个平行测试通道，每持有一个标准玻璃显微镜玻片大小的优惠券，或导管或限制的长度。滴流式反应器是理想的微传感器监测，一般生物膜研究，生物膜cryosectioning样品，高生物量生产，医用材料的评价，并留置医疗器械检测 6,7,8,9 。
旋转圆盘式反应器由聚四氟乙烯包含可移动优惠券的凹槽的磁盘。10可拆卸的优惠券可以由任何可加工材料。旋转盘的底部有一个条形磁铁，让创建跨磁盘旋转液体表面剪切表面冲洗券。 1000毫升的玻璃侧臂的反应堆压力容器是摆在整个磁盘，其中包含18券。液体增长媒体是通过船只的分发，而磁盘是由磁力搅拌器旋转。优惠券是从反应堆压力容器，然后刮下收集生物膜样本作进一步研究或显微成像。旋转圆盘反应器是专为实验室生物杀灭剂的功效，去除生物膜和防污材料的性能评价。9,11,12,13
Protocol
1。滴流生物膜反应器滴流生物膜反应器（Biosurface技术或定制设计的版本，通常可以由大学机械厂，看到图1）是组装和灭菌。大会涉及商会和保护室盖张贴券。随着生物膜的介质（胰蛋白酶大豆肉汤2克/ L和葡萄糖2克/升），和营养管进水室，高压灭菌消毒。 接种的滴流式反应器是预制反应器放置在一个平面上，夹紧污水管线，灌装用10 mL的胰蛋白酶大豆肉汤每个分庭，加入1…
Discussion
在不同的反应堆生长的生物膜，往往会产生不同的特点和每个反应器具有不同的应用。在这项工作中，我们描述了两个生物膜反应器的使用：滴流生物膜反应器和一个旋转的磁盘反应堆。滴流电抗器是有用和越来越低气 – 液界面剪切生物膜，适应各种条件。我们发现大量的生物膜生物量是可取的研究极为方便。这种设置可以很容易地适应对涉及的微传感器的监测和测试潜在的antibiofilm表面研究。 <…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
NIAID的赠款K22AI081748。
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Drip Flow Reactors | BioSurface Technologies Corporation | DFR 110 | ||
| Rotating Disk Reactors | BioSurface Technologies Corporation |
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Cite This Article
Schwartz, K., Stephenson, R., Hernandez, M., Jambang, N., Boles, B. R. The Use of Drip Flow and Rotating Disk Reactors for Staphylococcus aureus Biofilm Analysis. J. Vis. Exp. (46), e2470, doi:10.3791/2470 (2010).