Doğum Sonrası Beyin Nöronal Göç Yüksek Çözünürlüklü Zaman Aşımı Görüntüleme için bir Organotipik Dilim Testi
Summary
Bu protokol, postnatal beyin ve rostral göçmen akışı neuroblast göç yüksek çözünürlüklü zaman atlamalı görüntüleme için optimize edilmiş bir Organotipik dilim tahlil açıklamaktadır.
Abstract
Progenitör hücrelerin, neuroblasts göç yanı sıra, mevcut nöral devrelerin farklılaşma ve yeni nöronlar entegrasyonu yayılması: doğum sonrası beyindeki nöron üç biyolojik olaylar bakım bağlıdır. Koku ampuller doğum sonrası nöron için, bu olayların üç anatomik olarak farklı alanlar içinde ayrı: proliferasyon neuroblasts rostral göçmen akışı (RMS) aracılığıyla hareket göç büyük ölçüde, lateral ventriküllerin subependimal bölgesi (SEZ) oluşur ve yeni nöronlar ayırt etmek ve koku ampuller (OB) içinde entegre. Bu üç etki alanı biyolojik olayların her belirgin düzenleyen, hücresel, moleküler ve fizyolojik mekanizmaların çalışması için ideal bir platform olarak hizmet vermektedir. Bu yazıda, ekstraselüler koşulları yakından neuroblasts göç in vivo ortamda taklit postnatal beyin dokusu için optimize edilmiş bir Organotipik dilim testi açıklar. Biz tahlil, üniforma, odaklı ve hızlı hareket için RMS içinde neuroblasts sağladığını göstermektedir. Bu testte, farklı genetik geçmişleri fareler çapraz nakli yaklaşımlar kullanılarak nöronal göçün hücre özerk ve özerk olmayan bir yönetmelik çalışması için son derece uygun olacaktır.
Protocol
Discussion
RMS Nöronal göç koku ampuller 1 postnatal nöron önemli bir bileşeni. Göç yoluyla RMS beynin yüzeyine teğet bir düzlem oluşur. Teğet göç neuroblasts radyal yanı sıra, son nöronal ürünler 1, 2, 3 ıraksak kaderi kendi progenitör kaynağının yerini dayalı hücreler göç farklıdır. Postnatal RMS teğet göç hücrelerinin oldukça saf bir nüfus bu anatomik olarak tanımlanabilir bölge teğet göç mekanizmaları çalışmak için optimum bir platform yapar. Nöronal göçü…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Dan McWhorter video protokol anlatan için teşekkür ederiz. Bu çalışma NIH Hibe 5R01NS062182 Yaşlanma Araştırma Amerikan Federasyonu hibe ve HTG verilen kurumsal fonlar tarafından desteklenmektedir.
References
- Ghashghaei, H. T., Lai, C., Anton, E. S. Neuronal migration in the adult brain: are we there yet. Nat. Rev. Neurosci. 8, 141-151 (2007).
- Valiente, M., Marin, O. Neuronal migration mechanisms in development and disease. Curr. Opin. Neurobiol. 20, 68-78 (2010).
- Rakic, P. Evolution of the neocortex: a perspective from developmental biology. Nat. Rev. Neurosci. 10, 724-735 (2009).
- Jaglin, X. H., Chelly, J. Tubulin-related cortical dysgeneses: microtubule dysfunction underlying neuronal migration defects. Trends Genet. 25, 555-566 (2009).
- Carro, M. S. The transcriptional network for mesenchymal transformation of brain tumours. Nature. 463, 318-325 (2010).
- Wu, W. Directional guidance of neuronal migration in the olfactory system by the protein Slit. Nature. 400, 331-336 (1999).
- Hu, H., Tomasiewicz, H., Magnuson, T., Rutishauser, U., U, . The role of polysialic acid in migration of olfactory bulb interneuron precursors in the subventricular zone. Neuron. 16, 735-743 (1996).
- Shapiro, E. M., Gonzalez-Perez, O., Garcia-Verdugo, M. a. n. u. e. l., Alvarez-Buylla, J., &, A., Koretsky, A. P. Magnetic resonance imaging of the migration of neuronal precursors generated in the adult rodent brain. Neuroimage. , (2006).
- Vreys, R. MRI visualization of endogenous neural progenitor cell migration along the RMS in the adult mouse brain: validation of various MPIO labeling strategies. Neuroimage. 49, 2094-2103 (2010).
- Davenne, M., Custody, C., Charneau, P., Lledo, P. M. In vivo imaging of migrating neurons in the mammalian forebrain. Chem. Senses. 30, 115-116 (2005).
- Mirzadeh, Z., Doetsch, F., Sawamoto, K., Wichterle, H., Alvarez-Buylla, A. The subventricular zone en-face: wholemount staining and ependymal. J. Vis. Exp. , (2010).
- Shen, Q. Adult SVZ stem cells lie in a vascular niche: a quantitative analysis of niche cell-cell interactions. Cell Stem Cell. 3, 289-300 (2008).
- Tavazoie, M. A specialized vascular niche for adult neural stem cells. Cell Stem Cell. 3, 279-288 (2008).
- Mirzadeh, Z., Merkle, F. T., Soriano-Navarro, M., Garcia-Verdugo, J. M., Alvarez-Buylla, A. Neural Stem Cells Confer Unique Pinwheel Architecture to the Ventricular Surface in Neurogenic Regions of the Adult Brain. Cell Stem Cell. 3, 265-278 (2008).
- Polleux, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Ghosh, A. The slice overlay assay: a versatile tool to study the influence of extracellular signals on neuronal. Sci. STKE. , L9-L9 (2002).
- Murase, S. &. a. m. p. ;. a. m. p., Horwitz, A. F. Deleted in colorectal carcinoma and differentially expressed integrins mediate the directional migration of neural precursors in the rostral migratory stream. J. Neurosci. 22, 3568-3579 (2002).
- Suzuki, S. O. &. a. m. p. ;. a. m. p., Goldman, J. E. Multiple cell populations in the early postnatal subventricular zone take distinct migratory pathways: a dynamic study of glial and neuronal progenitor migration. J. Neurosci. 23, 4240-4250 (2003).
- Ghashghaei, H. T. The role of neuregulin-ErbB4 interactions on the proliferation and organization of cells in the subventricular zone. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 103, 1930-1935 (2006).
- Khodosevich, K., Seeburg, P. H., Monyer, H. Major signaling pathways in migrating neuroblasts. Front Mol. Neurosci. 2, 7-7 (2009).
- Jacquet, B. V. Analysis of neuronal proliferation, migration and differentiation in the postnatal brain using equine infectious anemia virus-based lentiviral vectors. Gene Ther. 16, 1021-1033 (2009).
