Оценка сигнализации Свойства эктодермальная эпителия Во время черепно-лицевых развития
Summary
В этой статье описывается методика трансплантации тканей, который был разработан для тестирования сигнализации и структурирование свойств поверхности головной эктодермы при черепно-лицевой развития.
Abstract
Доступность птичьего эмбриона помог экспериментальных эмбриологов понять судьбы клеток в процессе развития и роль ткань взаимодействий, которые регулируют структурирование и морфогенеза позвоночных животных (например, 1, 2, 3, 4). Здесь мы проиллюстрируем метод, который использует это доступность для тестирования сигнализации и структурирование свойств тканей эктодермального в лице развития. В этих экспериментах мы создаем перепел-5 куриных или мышь-6 куриных химеры путем пересадки поверхности головной эктодермы, который охватывает верхнюю челюсть из перепелиных или мыши на любом же регионе или внематочной области куриных эмбрионах. Использование перепелиных качестве донорских тканей для трансплантации птенцов была разработана, чтобы воспользоваться ядрышковых маркер присутствует в перепела, но не клеток куриного, что позволило исследователям различать хозяина и донорских тканей 7. Кроме того, повторяющиеся элемент присутствует в геноме мыши и выражается повсеместно, что позволяет нам различать хозяина и донорских тканей у мышей-химер куриных 8. Использование мыши эктодермы в качестве донора ткани значительно расширить наше понимание этих тканей взаимодействия, потому что это позволит нам проверить сигнализацию свойства эктодермы получены из различных мутантных эмбрионов.
Protocol
Discussion
Используя этот метод трансплантации позволило нам определить, что эктодерма содержит сигнальной информации, регулирующий дорсовентральной полярности и proximodistal расширение верхней челюсти. Сходство результатов при использовании перепела или мыши эктодермы и сохранения молекулярные …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа финансировалась R01-R01 и DE018234-DE019638.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 1x PBS | TEK | TEKZR114 | ||
| DMEM | UCSF | CCFDA003 | ||
| BSA | SIGMA | A7906 | ||
| Dispase | GIBCO | 17105-041 | ||
| 35×10 mm Petri dish | Falcon | 1008 | ||
| No. 5 Dumont forceps | Fine Science Tools | 11252-20 | ||
| Scissors | Fine Science Tools | 14058-11 | ||
| Spring Scissors | Fine Science Tools | 15010-11 | ||
| Needle holder | Fine Science Tools | 26016-12 | ||
| Tungsten Needle | Fine Science Tools | 26000 | ||
| Microcapillary tube | Drummond Scientific Company | 3-000-225-G | ||
| Pasteur Pipets | Fisher | 13-678-6B | ||
| Spring scissors | Fine Science Tools | 15010-11 | ||
| Blade holder | Fine Science Tools | 10052-11 | ||
| Razor blade | Fine Science Tools | 10050-00 |
References
- Noden, D. M. The Role of the Neural Crest in Patterning of Avian Cranial Skeletal, Connective, and Muscle Tissues. 발생학. 96, 144-144 (1983).
- Bronner-Fraser, M., Stern, C. Effects of Mesodermal Tissues on Avian Neural Crest Cell Migration. 발생학. 143, 213-213 (1991).
- Schneider, R. A. Neural crest can form cartilages normally derived from mesoderm during development of the avian head skeleton. 발생학. 208, 441-441 (1999).
- Couly, G. Interactions between Hox-negative cephalic neural crest cells and the foregut endoderm in patterning the facial skeleton in the vertebrate head. Development. 129, 1061-1061 (2002).
- Evans, D. J., Noden, D. M. Spatial relations between avian craniofacial neural crest and paraxial mesoderm cells. Dev Dyn. , (2006).
- Hu, D., Marcucio, R., Helms, J. A. A zone of frontonasal ectoderm regulates patterning and growth in the face. Development. 130, 1749-1749 (2003).
- Hu, D., Marcucio, R. S. Unique organization of the frontonasal ectodermal zone in birds and mammals. Dev Biol. 325, 200-200 (2009).
- Le Lièvre, C. S., Le Douarin, N. M. Mesenchymal derivatives of the neural crest: analysis of chimaeric quail and chick embryos. Journal of Embryology and Experimental Morphology. 34, 125-125 (1975).
- Bollag, R. J. Use of a repetitive mouse B2 element to identify transplanted mouse cells in mouse-chick chimeras. Exp Cell Res. 248, 75-75 (1999).
- Korn, M. J., Cramer, K. S. Windowing chicken eggs for developmental studies. J Vis Exp. , (2007).
- Eames, B. F., Schneider, R. A. Quail-duck chimeras reveal spatiotemporal plasticity in molecular and histogenic programs of cranial feather development. Development. 132, 1499-1499 (2005).
- Odent, S. Expression of the Sonic hedgehog (SHH ) gene during early human development and phenotypic expression of new mutations causing holoprosencephaly. Hum Mol Genet. 8, 1683-1683 (1999).
- Szabo-Rogers, H. L. Novel skeletogenic patterning roles for the olfactory pit. Development. 136, 219-219 (2009).
