व्यायाम प्रेरित लिम्फोसाइट Apoptosis के निर्धारण के लिए रक्त उंगली छड़ी नमूनाकरण पद्धति
Summary
व्यायाम प्रतिरक्षा कोशिकाओं में apoptosis उत्प्रेरण के लिए सक्षम है. वहाँ विभिन्न माप सीमाएं हैं, विशेष रूप से समय की राशि को अलग करने और आकलन करने के लिए पहले एक खून का नमूना के इलाज के लिए आवश्यक करने के लिए संबंधित. का प्रदर्शन किया व्यायाम प्रेरित लिम्फोसाइट apoptosis के विश्लेषण के लिए एक तेजी से और न्यूनतम इनवेसिव प्रक्रिया है.
Abstract
व्यायाम एक शारीरिक उत्तेजना प्रतिरक्षा कोशिकाओं में apoptosis उत्प्रेरण के लिए सक्षम है. तिथि करने के लिए, इस घटना के माप के साथ विभिन्न सीमाओं की पहचान की गई है, विशेष रूप से समय की राशि को अलग और कोशिका मृत्यु का मूल्यांकन करने से पहले एक खून का नमूना के इलाज के लिए आवश्यक करने के लिए संबंधित. इस वजह से, यह मुश्किल है निर्धारित करने के लिए है कि क्या प्रतिरक्षा सेल apoptosis में रिपोर्ट बढ़ जाती है प्रणाली पर व्यायाम के वास्तविक प्रभाव के लिए योगदान किया जा सकता है, या समय और अंततः इस माप प्राप्त करने के लिए आवश्यक प्रसंस्करण का एक प्रतिबिंब हैं. इस अनुच्छेद में हम व्यायाम प्रेरित लिम्फोसाइट apoptosis के विश्लेषण के लिए एक तेजी से और न्यूनतम इनवेसिव प्रक्रिया प्रदर्शित करता है. अन्य तकनीकों के विपरीत, पूरे रक्त एक एंटीबॉडी पैनल में जोड़ा जाता है तुरंत एक नमूना प्राप्त करने पर. ऊष्मायन अवधि के बाद, लाल रक्त कोशिकाओं lysed हैं और नमूने विश्लेषण किया जा के लिए तैयार हैं. उंगली छड़ी एक नमूना प्रक्रिया के उपयोग की आवश्यकता रक्त की मात्रा कम कर देता है, और विषयों के लिए बेचैनी कम से कम.
Protocol
Discussion
व्यायाम प्रेरित apoptosis लिम्फोसाइट के दोनों जल्दी और देर चरणों के विश्लेषण के लिए एक न्यूनतम इनवेसिव नमूना संग्रह की प्रक्रिया और बाद में विश्लेषण प्रदर्शन किया है. यह भी संभव है स्पष्ट रूप से उन कोशिकाओ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस शोध पश्चिमी केंटकी विश्वविद्यालय में संकाय छात्रवृत्ति परिषद से एक नई संकाय अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Flow Cytometry Binding Buffer | eBioscience | 00-4222-26 | ||
| RBC Lysis Buffer | eBioscience | 00-4333-57 | ||
| Lancet Device | Accu Check Soft Touch | Roche Diagnostics Corp. | ||
| Capillary tubes | Heparinized Capillary Tubes | Chase Scientific Glass, Inc. | 501 | |
| Centrifuge | GmC Lab | Gilson | PMS-880 | |
| Annexin V-FITC Conjugated | Biovision Inc. | K201-400-1 | ||
| CD4-PE Conjugated | Anti-human, clone RPA-T4 | eBioscience | 12-0049-42 | |
| CD8-PE Conjugated | Anti-human, clone OKT8 | eBioscience | 12-0086-73 | |
| CD19-PE Conjugated | Anti-human, clone HIB19 | eBioscience | 12-0199-42 | |
| 7-AAD Viability Staining Solution | eBioscience | 00-6993-50 | ||
| CD45RA-APC Conjugated | Anti-human, clone HI100 | eBioscience | 17-0458-42 | |
| Flow cytometer | C6 | Accuri |
References
- Simpson, R. J., Florida-James, G. D., Whyte, G. P., Black, J. R., Ross, J. A., Guy, K. Apoptosis does not contribute to the blood lymphocytopenia observed after intensive and downhill treadmill running in humans. Res. Sports Med. 15, 157-174 (2007).
- Steensberg, A., Morrow, J., Toft, A. D., Bruunsgaard, H., Pedersen, B. K. Prolonged exercise, lymphocyte apoptosis and F2-isoprostanes. Eur. J. Appl. Physiol. 87, 38-42 (2002).
- Mooren, F. C., Bloming, D., Lechtermann, A., Lerch, M. M., Völker, K. Lymphocyte apoptosis after exhaustive and moderate exercise. J. Appl. Physiol. 93, 147-153 (2002).
- Peters, E. M., Eden, M. V. a. n., Tyler, N., Ramautar, A., Chutergoon, A. A. Prolonged exercise does not cause lymphocyte DNA damage or increased apoptosis in well-trained endurance athletes. Eur. J. Appl. Physiol. 98, 124-131 (2006).
- Wang, J. -. S., Huang, Y. -. H. Effects of exercise intensity on lymphocyte apoptosis induced by oxidative stress in men. Eur. J. Appl. Physiol. 95, 290-291 (2005).
- Mooren, F. C., Lechtermann, A., Völker, K. Exercise-induced apoptosis of lymphocytes depends on training status. Med. Sci. Sports Exerc. 36, 1476-1483 (2004).
- Navalta, J. W., Sedlock, D. A., Park, K. -. S. Blood treatment influences the yield of apoptotic lymphocytes after maximal exercise. Med. Sci. Sports Exerc. 37, 369-373 (2005).
