Engineered Kalp Doku İmplantasyonu takiben İmmün Yanıtların Değerlendirilmesi (EHT) Biyoparlaklık Görüntüleme
Summary
Bu video kullanımını gösterir<em> In vivo</em> Biyoparlaklık görüntüleme sıçanlarda Engineered Kalp Dokusu implantasyonu (EHT) sonra bağışıklık yanıtlarını okumak için.
Abstract
Çeşitli kardiyak doku mühendisliği teknikleri, yerli veya biyoyapay ya iskele malzemeleri, örneğin fibrin ve kollajen gibi hidrojeller, kardiyak miyositler miyosit mono tabakaları 1 tuzak ve istifleme kullanarak iskele stratejileri de dahil olmak üzere geçmiş yıllarda takip edilmiştir . Bu kavramlar tehlikeye kalp fonksiyonu (örneğin miyokard enfarktüsü sonra) restorasyonu veya deneysel modellerde (örneğin tahmin toksikoloji ve madde taraması ya da hastalık modelleme) olarak hedefliyoruz. Mühendislik kalp dokusu (EHT) implantasyon sonrası hücre sağkalım hassas izleme biyoparlaklık görüntüleme (BLI) teknikleri 2-vivo kullanarak mümkün hale gelmiştir. Burada bir ateşböceği lusiferaz (3 ROSA / lusiferaz LEW Tg) her yerde ifade ile transgenik sıçan suşu fibrin tabanlı EHT nesil açıklar. İmplantasyon EHT implantasyon sonrası alıcı organizmanın bağışıklık yanıtlarını değerlendirmek için farklı sıçan suşlarının büyük omentum içine yapılır. BLI ve Enzim Bağlı İmmüno Nokta Tekniği (ELISPOT) bağışıklık yanıtlarının değerlendirilmesi için BLI kullanılabilirlik onaylayın tarafından oluşturulan sonuçların karşılaştırılması.
Protocol
Discussion
Klinik uygulama önce kalp onarımı için EHT teknoloji, implantasyon sonrası hücresel ve matriks bileşenleri veya greft sağkalım immünojenitesini gibi temel sorular deneysel modellerde değerlendirilmesi gerekir. In-vivo biyoparlaklık görüntüleme transplantasyonu sonrası izleme hücrenin hayatta kalabilmek için yeni ve yararlı bir tekniği temsil eder . Biz başarıyla içeren fibrin tabanlı EHT oluşturulan olumlu lusiferaz (luc +) kurulmuş bir protokol 4 adaptasyon kalp hücreleri….
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Sonja Schrepfer, Lenard Conradi ve Arne Hansen Deutsche Forschungsgemeinschaft (SCHR992/3-1, SCHR992/4-1, CO 858/1-1, HA 3423/3-1 DFG) fon aldı. Bu çalışma aynı zamanda, Avrupa Birliği Thomas Eschenhagen (EUGeneHeart ve Angioscaff) hibe tarafından desteklenen oldu.
Materials
- LEW-Tg(Gt(ROSA)26Sor-luc)11Jmsk rats (NBPR rat number 0299, http://www.anim.med.kyoto-u.ac.jp/NBR/)
- Bovine fibrinogen (stock solution: 200 mg/ml plus aprotinin 5 μg/ml fibrinogen in NaCl 0.9%, Sigma F4753)
- Matrigel (BD Bioscience 356235)
- DMEM (Biochrome F0415)
- Horse serum (Gibco 26050)
- Penicillin/streptomycin (Gibco 15140)
- Insulin (Sigma-Aldrich I9278)
- Aprotinin (Sigma Aldrich A1153)
- d-Luciferin (Biosynth L-8220)
- Enzyme-linked immunosorbent spot (ELISpot) assay plates (Hassa Laborbedarf, S2EM004M99)
References
- Eschenhagen, T., Zimmermann, W. H. Engineering myocardial tissue. Circ Res. 97, 1220-1231 (2005).
- van der Bogt, K. E., Schrepfer, S., Yu, J. Comparison of transplantation of adipose tissue- and bone marrow-derived mesenchymal stem cells in the infarcted heart. Transplantation. 87, 642-652 (2009).
- Hakamata, Y., Murakami, T., Kobayashi, E. “Firefly rats” as an organ/cellular source for long-term in vivo bioluminescent imaging. Transplantation. 81, 1179-1184 (2006).
- Hansen, A., Eder, A. Development of a Drug Screening Platform Based on Engineered Heart Tissue. Circ Res. , (2010).
