網膜神経節細胞の生存を研究するために視神経挫滅モデルマウス
Summary
このプロトコルは、逆行性に網膜神経節細胞、およびどのように続いて網膜神経節細胞の生存とアポトーシスを分析するために視神経挫滅するためにラベルを付ける方法を示しています。それは、緑内障を含む視神経障害の様々なタイプ、のための実験的疾患モデルです。
Abstract
視神経への損傷は不可逆的な視力喪失につながる網膜神経節細胞（RGCs）、の緩やかな死が続く、軸索変性につながることができます。人間のような疾患の例としては、外傷性視神経障害、緑内障の視神経の変性などがあります。それは、視力低下や失明につながる視神経の頭の中で典型的な変化、進歩的な視神経の変性、および網膜神経節細胞の消失、制御されていない場合、によって特徴付けられる。
視神経クラッシュ（ONC）傷害のマウスモデルでは、外傷性視神経障害のための重要な実験的な疾患モデル、このモデルでは緑内障など、視神経が徐々に網膜神経節細胞のアポトーシスに導くに圧挫です。この疾患モデル、治療手段の開発に不可欠な神経細胞死と生存、の一般的なプロセスとメカニズムを研究するために使用することができます。さらに、薬理学的および分子的アプローチは、異なるタイプの視神経障害の治療に潜在的な治療薬を特定し、テストするには、このモデルで使用することができます。
ここでは、1日目における網膜神経節細胞のベースライン逆行性標識法（RGCs）、4日目（II）視神経挫滅、（III）網膜を収穫し、一日でRGC生存率を分析（I）のステップのデモンストレーションでステップを提供する11、および（IV）代表の結果。
Protocol
Discussion
視神経挫滅モデルマウスは、RGC死と生存の過程を研究するのに便利です。このモデルはまた、しばしばRGCアポトーシスと生存の異なる試薬と遺伝子の影響を調査するために使用されます。このモデルの利点の1つは、最小限のバリエーションを持つ再現性の高い学位を持っているということです。
しかし、特別な注意はこのモデルではいくつかのステップが必要です。彼?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我々の研究は、NIH、国立眼研究所の学内研究プログラムによってサポートされています。
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Stereotaxic apparatus | ASI Instruments | SAS-4100 | ||
| Dissecting microscope | World Precision Instruments | PZMIV-BS | ||
| Scalpel handle | Fine Science Tools | 10003-12 | ||
| Scalpel Blades #15 | Fine Science Tools | 10015-00 | ||
| Microdrill | Fine Science Tools | 18000-17 | ||
| Suture needle | Fine Science Tools | 12050-03 | ||
| Spring scissors | Fine Science Tools | 16144-13 | ||
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11252-50 | ||
| Hamilton syringe | Hamilton Company | 88400 | ||
| Gauze sponges | Office Depot | 674889 | ||
| Fluorochrome | Sigma | 39286 | ||
| Alcohol | Sigma | 459844 | 70% | |
| H2O2 | Sigma | H3410 | 3% |
References
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