Katı Plaka tabanlı Diyet Kısıtlama Caenorhabditis elegans</em
Summary
Burada plaka tabanlı katı diyet kısıtlaması yapmak için bir protokol mevcut<em> C. elegans</em> Öldürülmüş bakteri.
Abstract
Yetersiz beslenme veya açlık olmadan gıda alımının azaltılması, ömrünü uzatır ve memeliler dahil olmak üzere çeşitli türlerin geniş bir yelpazede, yaşa bağlı hastalıkları, başlangıcından gecikme bilinir. Aynı zamanda vücut ağırlığı ve doğurganlık azalması yanı sıra, plazma glukozu, insülin ve IGF-1, bu hayvanlarda düşük seviyelerde neden olur. Bu tedavi genellikle diyet kısıtlaması (DR) ya da kalori kısıtlaması (CR) olarak adlandırılır. Nematod Caenorhabditis elegans yaşlanma biyoloji eğitimi için önemli bir model organizma olarak ortaya çıkmıştır. Her ikisi de çevresel ve genetik manipülasyonlar modeli DR kullanılmış olan ve C. ömrünü uzatmaya göstermiştir elegans. Ancak, C. içinde bildirilen DR çalışmaları birçok elegans yaşlanma alanında genetik çalışmaların çoğu standart katı agar petri tabak yapıldı, sıvı ortamda hayvanların propaganda yapıldı. Burada öldürülmüş bakteri içeren standart katı NGM agar tabanlı plaka kullanarak DR protokol sunuyoruz.
Protocol
Discussion
Diyet kısıtlaması (DR) ömrünü uzatır ve türlerin 5-7 memeliler dahil olmak üzere geniş bir yelpazede, çeşitli yaşa bağlı hastalıkların başlamasını geciktirmek için bilinir. Hem çevresel ve genetik manipülasyonlar C modeli DR kullanılmıştır elegans kültür solucanlar da dahil olmak üzere tanımlanmış yarı sıvı bir ortamda 8,9, 10-12 sıvı bir ortamda bakteri besin kaynağı seyreltme ve daha yavaş bir hızda 13 yaşında davranış mut…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu çalışma, A.-LH Nathan Şok Merkezi (P30 AG13283) ve Ulusal Yaşlanma Enstitüsü (NIA) R01 hibe (R01 AG028516) bir pilot ödül tarafından desteklenen
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Carbenicillin | Duchefa Biochemie | C0109.25 | Dissolved in water. |
| Kanamycin | Roche | 10106801001 | Dissolved in water. |
| Bacto-peptone | Becton, Dickinson and company | DF0118072 | |
| Bacto-tryptone | Becton, Dickinson and company | DF0123075 | |
| Bacto-yeast extract | Becton, Dickinson and company | DF0127071 | |
| Agar | Becton, Dickinson and company | DF00145170 | |
| Sterile culture tube | USA Scientific | 1485-0810 | |
| Spectrophotometer | Amersham Biosciences | Gene Quant pro | Amersham is now part of GE Healthcare. |
| Dissecting Microscope | Zeiss | Stemi 2000 | |
| Centrifuge | Beckman Coulter | Accuspin FR |
References
- Hsu, A. L., Murphy, C. T., Kenyon, C. Regulation of aging and age-related disease by DAF-16 and heat-shock factor. Science. 300, 1142-1145 (2003).
- Kenyon, C., Chang, J., Gensch, E., Rudner, A., Tabtiang, R. A C. elegans mutant that lives twice as long as wild type. Nature. 366, 461-464 (1993).
- Apfeld, J., Kenyon, C. Regulation of lifespan by sensory perception in Caenorhabditis elegans. Nature. 402, 804-809 (1999).
- Ching, T. T., Paal, A. B., Mehta, A., Zhong, L., Hsu, A. L. drr-2 encodes an eIF4H that acts downstream of TOR in diet-restriction-induced longevity of C. elegans. Aging Cell. 9, 545-557 (2010).
- Weindruch, R., Walford, R. . The Retardation of Aging and Disease by Dietary Restriction. , (1988).
- Masoro, E. J. Subfield history: caloric restriction, slowing aging, and extending life. Sci Aging Knowledge Environ. , RE2-RE2 (2003).
- Masoro, E. J. Overview of caloric restriction and ageing. Mech Ageing Dev. 126, 913-922 (2005).
- Houthoofd, K. Axenic growth up-regulates mass-specific metabolic rate, stress resistance, and extends life span in Caenorhabditis elegans. Exp Gerontol. 37, 1371-1378 (2002).
- Houthoofd, K. No reduction of metabolic rate in food restricted Caenorhabditis elegans. Exp Gerontol. 37, 1359-1369 (2002).
- Klass, M. R. Aging in the nematode Caenorhabditis elegans: major biological and environmental factors influencing life span. Mech Ageing Dev. 6, 413-429 (1977).
- Bishop, N. A., Guarente, L. Two neurons mediate diet-restriction-induced longevity in C. elegans. Nature. 447, 545-549 (2007).
- Panowski, S. H., Wolff, S., Aguilaniu, H., Durieux, J., Dillin, A. PHA-4/Foxa mediates diet-restriction-induced longevity of C. elegans. Nature. 447, 550-555 (2007).
- Lakowski, B., Hekimi, S. The genetics of caloric restriction in Caenorhabditis elegans. Proc Natl Acad Sci U S A. 95, 13091-13096 (1998).
- Kaeberlein, T. L. Lifespan extension in Caenorhabditis elegans by complete removal of food. Aging Cell. 5, 487-494 (2006).
- Greer, E. L. An AMPK-FOXO pathway mediates longevity induced by a novel method of dietary restriction in C. elegans. Curr Biol. 17, 1646-1656 (2007).
